تجميد وتخزين الأجنة يتطلب درجة حرارة عالية الاستقرار ، بيئة معقمة و سلامة العينة التقليدية النيتروجين السائل الدبابات قد يؤدي إلى انخفاض النشاط أو حتى تعطيل الأجنة بسبب التلوث الصليب ، تفاوت درجة الحرارة ، وارتفاع مخاطر التشغيل من العينات مباشرة غارقة في النيتروجين السائل . المرحلة الغازية خزان النيتروجين السائل يمكن أن تمنع بشكل فعال هذه النقاط المؤلمة من خلال تصميم " غير المباشرة انخفاض درجة الحرارة التوصيل " . في هذه الورقة ، مع الجمع بين المتطلبات التقنية من أجل الحفاظ على الأجنة المجمدة ، ومزايا المرحلة الغازية خزان النيتروجين السائل تم تمشيط ، ومعايير اختيار النموذج العملي الموصى بها ، جنبا إلى جنب مع استخدام وصيانة النقاط الرئيسية ، مثل مختبر الطب التناسلي ، وتربية الحيوانات ، والمؤسسات ، مثل توفير مرجع موثوق بها .

نقطة الألم الأساسية التقليدية في خزان النيتروجين السائل

الأجنة هي حساسة للغاية العينات البيولوجية التي تستجيب للتغيرات الطفيفة في بيئة التخزين . عيوب التصميم التقليدية النيتروجين السائل الدبابات عرضة لمخاطر متعددة :

( أ ) ارتفاع خطر التلوث العابر

إذا كان أحد تخزين الأنابيب التالفة ، محتويات العينة سوف تتسرب إلى النيتروجين السائل وتلوث أنابيب التخزين الأخرى . وفي الوقت نفسه ، على المدى الطويل استخدام النيتروجين السائل من السهل أن تولد البكتيريا والفطريات ( مثل الميكوبلازما ) ، استبدال النيتروجين السائل يمكن أن يؤدي أيضا إلى الملوثات الخارجية . اثنا عشر عينات من الأجنة كانت مصابة الميكوبلازما في المختبر التناسلي بسبب تلوث النيتروجين السائل في المرحلة السائلة للدبابات .

' 2 ` تقلبات درجات الحرارة الكبيرة

هناك تأثير الحمل الحراري النيتروجين السائل في المرحلة السائلة للدبابات ، درجة الحرارة من السهل أن ترتفع إلى أقل من - 180 درجة مئوية بسبب الاتصال مع الهواء في المنطقة بالقرب من خزان الفم ، في حين أن درجة الحرارة في الجزء السفلي من الخزان حوالي - 196 درجة مئوية ، الفرق في درجة الحرارة يمكن أن تصل إلى أكثر من 15 درجة مئوية . تجميد الأجنة يجب أن تكون مستقرة في - 190 ℃ - 196 ℃ و تذبذب درجة الحرارة يمكن أن تدمر بنية الجليد من الخلايا الجنينية ، والحد من معدل البقاء على قيد الحياة بعد ذوبان الجليد .

( ج ) مخاطر كبيرة في الحصول على واستخدام

النيتروجين السائل يجب أن تكون المقدمة من تخزين الرف عند أخذ الجنين في خزان السائل ، عينة يتعرض إلى درجة حرارة الغرفة لفترة أطول ( عادة 3-5 دقائق ) . وفي الوقت نفسه ، يجب على المشغلين الاتصال المباشر مع انخفاض درجة حرارة النيتروجين السائل ، وهناك خطر الصقيع .

ميزة أساسية من النيتروجين السائل خزان الغاز مع الجنين بالتبريد

من خلال تصميم " النيتروجين السائل المخزنة في الجزء السفلي ، وانخفاض درجة حرارة الغاز شكلت المنطقة في الجزء العلوي من الخزان " ، الغاز السائل خزان النيتروجين يمكن أن تتطابق مع متطلبات تخزين الأجنة المجمدة بدقة .

( أ ) عدم الاتصال المباشر ووضع حد للتلوث العابر

الجنين تخزين الرف يقع في منطقة الغاز في الخزان ، لا الاتصال المباشر مع النيتروجين السائل ، حتى لو كان تخزين الأنابيب التالفة ، والمحتوى لا تتسرب إلى النيتروجين السائل . وفي الوقت نفسه ، عالية الجودة خزان الغاز مجهزة هيبا فلتر الهواء ذات الكفاءة العالية ( دقة الترشيح 0.3 ميكرون ) ، يمكن أن تكمل النيتروجين السائل أو فتح الباب عند استخدامها لتصفية الشوائب الخارجية ، النيتروجين السائل في خزان استبدال الفترة الممتدة إلى 3-6 أشهر ، والحد بشكل كبير من احتمال التلوث .

( ب ) درجة الحرارة موحدة ، وتقلب مجموعة صغيرة

درجة الحرارة في خزان الغاز يمكن توزيعها بشكل موحد من خلال تبخر النيتروجين السائل في الجزء السفلي على شكل طبقة الغاز مستقرة ، الفرق في درجة الحرارة في مناطق مختلفة من خزان الغاز هو أقل من أو يساوي 3 درجة مئوية ، ويمكن الحفاظ على بيئة مستقرة من - 192 درجة مئوية إلى 196 درجة مئوية لفترة طويلة . بعض البيانات التجريبية تبين أن معدل البقاء على قيد الحياة من الأجنة المخزنة في خزان الغاز هو 12 ٪ - 15 ٪ أعلى من ذلك في خزان السائل .

الحصول على واستخدام مريحة ، والحد من المخاطر التشغيلية

تخزين الرف ارتفاع خزان الغاز هو مناسبة لجسم الإنسان العملية . عندما أخذ العينات ، رف الجسم لا تحتاج إلى رفع خارج الخزان . بعض النماذج مجهزة " درج التخزين الهرمي " تصميم ، يمكن أن دقة تحديد موقع الجنين واحد ، وتجنب تكرار انقلاب رفوف التخزين الناجمة عن التقلبات في درجة الحرارة .

النقاط الرئيسية في اختيار المرحلة الغازية خزان النيتروجين السائل

اختيار نوع يجب أن تكون قريبة من " الأمن والاستقرار والراحة " ، مع التركيز على المعايير التالية :

( أ ) درجة الحرارة الأداء : يفضل انخفاض درجة الحرارة التوحيد نموذج ممتاز

نطاق القياس يجب أن تغطي - 200 ℃ 50 ℃ ، درجة حرارة التشغيل مستقرة - 190 ℃ - 196 ℃ ، درجة الحرارة التوحيد خطأ ≤ ± 2 ℃ ؛ مجهزة المزدوج البلاتين المقاومة استشعار درجة الحرارة ( على التوالي رصد غاز النيتروجين السائل المرحلة المنطقة المنطقة ) ، في الوقت الحقيقي التغذية المرتدة من درجة الحرارة داخل الخزان ، لتجنب نقطة واحدة من الفشل الناجم عن رصد الفشل .

` 2 ` سعة التخزين : مطابقة حجم العينة وتواتر الاستخدام

مختبر صغير ومتوسط الحجم ( متوسط 5-20 الأجنة المجمدة يوميا ) اختياري 100-300l القدرات ، مثل نموذج 300L يمكن أن تستوعب 10 رفوف تخزين الأجنة القياسية ( حوالي 50 عينات لكل منهما ) ؛ على نطاق واسع مركز الإنجابية أو عينة قاعدة البيانات يمكن أن يكون اختياريا 500-800l القدرات ، ودعم التقسيم الهرمي التخزين ، من السهل تصنيف العينة وإدارتها . ملاحظة : سعة التخزين يجب أن تكون محفوظة 20 ٪ من التكرار ، لتجنب كثرة فتح الباب يؤثر على استقرار درجة الحرارة .

( ج ) الختم والعزل الحراري : المرحلة الثانية فراغ العزل الحراري هو المفتاح

" الداخلية والخارجية بطانة فراغ العزل الحراري " هيكل ، معدل التبخر اليومي أقل من 1.5 في المائة ( 300 لتر نموذج ) ، والحد من النيتروجين السائل تجديد التردد . سيليكون المطاط الختم الدائري ( مقاومة درجات الحرارة المنخفضة - 60 ℃ - 200 ℃ ) يجب أن تستخدم لختم باب الخزان .

` 4 ` تصميم السلامة : حماية متعددة ضد المخاطر

يجب أن تكون مجهزة مع مستوى الإنذار المبكر ( عندما كمية النيتروجين السائل أقل من 1 / 3 من مجموع القدرة على التنبيه ) ، أكثر من درجة الحرارة التنبيه ( درجة حرارة أعلى من - 185 ℃ الزناد ) ، صمام الأمان ( الضغط داخل الخزان أكثر من 0.15 الآلام والكروب الذهنية الضغط التلقائي الإغاثة ) ؛ بعض النماذج التي تدعم الرصد عن بعد ( 4G أو واي فاي ) ، يمكن أن تدفع في الوقت الحقيقي درجة الحرارة ، مستوى البيانات إلى الهاتف التطبيق ، لا قيمة لها في الوقت المناسب لإدارة المخاطر .

التوصية نوع من الغاز السائل خزان النيتروجين مع ارتفاع التوافق

( أ ) يفضل المختبرات الصغيرة والمتوسطة الحجم : YDD-300 صهاريج النيتروجين السائل الغازية

قدرة 300L ، درجة حرارة التشغيل - 190 ℃ - 196 ℃ ، درجة الحرارة التوحيد ± 1.5 ℃ ، معدل التبخر اليومي 1.2 في المائة . اثنا عشر معيار رفوف تخزين الأجنة ( حوالي 600 عينة ) يمكن وضعها في وعاء ، درج نوع الطبقات تصميم مريحة مع . دعم الناقل التسلسلي العام تصدير البيانات ( تخزين 1 سنة سجل درجة الحرارة ) ، ومناسبة للتخزين المجمد يوميا 10-15 الأجنة في المختبر التناسلي ، بارزة في نسبة السعر إلى الجنس .

' 2 ` مصرف بيانات كبير الحجم مناسب : خزان غاز النتروجين السائل HXC-800 في هاير للطب البيولوجي؛

قدرة 800 لتر ، باستخدام مرحلتين فراغ العزل الحراري ، معدل التبخر اليومي 1.0 في المائة ، النيتروجين السائل تجديد دورة تصل إلى 6 أشهر . مجهزة HEPA نظام تنقية الهواء مع الأشعة فوق البنفسجية تعقيم وظيفة ( 10 دقائق بعد فتح الباب تلقائيا ) ، ومكافحة التلوث أكثر صرامة . دعم متعدد خزان الربط والرصد ( الوصول إلى مختبر نظام المسلمين ) ، مناسبة لتخزين أكثر من 2000 من الأجنة في مراكز التكاثر على نطاق واسع أو تربية الحيوانات قاعدة الاستقرار والأمن على حد سواء .

' 3 ` مشهد النقل المحمولة : أوكما DW-40W100 مصغرة خزان الغاز

قدرة 100 لتر ، وزن 35 كجم ( بما في ذلك النيتروجين السائل ) ، مجهزة عجلات عالمية لتسهيل نقل الأجنة على المدى القصير ( مثل نقل العينات بين المختبرات ) ؛ درجة حرارة التشغيل - 188 ℃ - 196 ℃ ، معدل التبخر اليومي 2 ٪ ، يمكن أن تستمر لمدة 7 أيام . فائدة نموذج يحتوي على مزايا عملية بسيطة ، صغيرة الحجم فريق البحث العلمي مع عينة صغيرة الحجم وكثرة الحركة .

مواصفات استخدام وصيانة المرحلة الغازية خزان النيتروجين السائل تجميد الأجنة

( أ ) قبل الاستخدام : قبل التبريد الكامل مهم

قبل استخدام النيتروجين الجاف يجب أن تستخدم لغسل وعاء ( إزالة الرطوبة ، ومنع الجليد ) ، ثم حقن النيتروجين السائل إلى 2 / 3 من مجموع القدرات ، لا تزال 24 ساعة قبل التبريد ، حتى درجة الحرارة استقرت تحت - 190 ℃ ثم وضع الجنين في العينة . العينة يجب أن تكون معبأة في مادة البولي بروبيلين العقيم تخزين الأنابيب مع علامات واضحة لتجنب الارتباك .

العملية اليومية : تقصير وقت فتح الباب ، وتوحيد استخدام

وقت فتح باب واحد ≤ 2 دقيقة ، عندما أخذ العينات ووضع المواقع بسرعة ، وتجنب تكرار دوران تخزين الرف . التحقق من مستوى النيتروجين السائل مرة واحدة في الأسبوع ، واستخدام خراطيم خاصة عند التجديد ( تجنب الشوائب مختلطة ) ، سرعة الحقن أقل من 5 لتر / دقيقة ، لمنع النيتروجين السائل من الرش .

` 3 ` الصيانة الدورية : ضمان أداء المعدات

تنظيف خزان ختم الباب كل شهر ( مسح مع 75 ٪ من الكحول لتجنب العفن ) ؛ معايرة أجهزة استشعار درجة الحرارة كل 3 أشهر ( بالمقارنة مع معيار درجة حرارة منخفضة ، خطأ زائد أو ناقص 0.5 ℃ ) ؛ التحقق من أداء العزل الحراري فراغ كل سنة ( إذا كان معدل التبخر اليومي بنسبة أكثر من 30 ٪ ، تحتاج إلى الاتصال بالشركة المصنعة للحفاظ على ) ، لضمان تشغيل المعدات على المدى الطويل والاستقرار .

من خلال تصميم موحد درجة الحرارة ، ومكافحة التلوث ، عملية سهلة ، المرحلة الغازية النيتروجين السائل للدبابات يمكن أن تحل الألم نقطة التقليدية النيتروجين السائل للدبابات . من أجل ضمان سلامة الجنين ، ونحن بحاجة إلى الجمع بين حجم العينة ، المشهد مطابقة القدرات والوظائف في اختيار نوع الجنين . بغض النظر عن البحث في الطب التناسلي أو الحفاظ على الموارد الوراثية الحيوانية ، وارتفاع تناسب المرحلة الغازية خزان النيتروجين السائل يمكن أن تصبح ضمانة موثوق بها من أجل الحفاظ على الأجنة المجمدة ، وتعزيز كفاءة العمل ذات الصلة .