هذه المجموعة هي لأغراض البحث فقط .

96T

الغرض من الاستخدام :

هذه المجموعة تستخدم للكشف عن الأجسام المضادة لفيروس الأنفلونزا في القرد المصل والبلازما وما يتصل بها من عينات السائل . . .(سيف أب)التعبير .

مبدأ التجربة

طقم مزدوجمستضداتساندويتش طريقة التصميمعينةوسطفيروس الانفلونزا القرد الضد(سيف أب)معبرمع تنقيةمستضداتالمغلفة لوحة microporous ، في الحالة الصلبةمستضدات，الأجسام المضادة لفيروس الأنفلونزا(سيف أب)غير ملزمة الأجسام المضادة وغيرها من المكونات التي يتم إزالتها بعد الغسيل ، ثم يتم غسلها .برنامج HRPملزمة مستضد ، مستضد تشكيل-الأجسام المضادة-انزيم المسمى مستضد المعقدةبعد الغسيلزائدالركيزةTMBاللون .TMBفي .برنامج HRPالانزيم هو تحويلها إلى اللون الأزرق و الأصفر في نهاية المطاف مع حمض . باستخدام انزيم العلامات450نانومترتحديد الامتصاصية تحت الطول الموجي )ODالقيمة (معكوتوفالأجسام المضادة لفيروس الانفلونزا القرد(سيف أب)وجود أو عدم وجود .

تكوين عدة

1	30مرات تركيز محلول الغسيل	20 ملس1قارورة	7	إنهاء السائل	6 ملس1قارورة
2	انزيم الكواشف القياسية	6 ملس1قارورة	8	السيطرة الإيجابية	0.5 ملس1قارورة
3	أنزيمحزمة قياسيةلوح	12ثقبس8مادة	9	السيطرة السلبية	0.5 ملس1قارورة
4	عينةمخفف	6 ملس1قارورة	10	تعليمات	1نسخ
5	لون المطورAسائل .	6 ملس1قارورة	11	لوحة ختم الفيلم	2تشانغ
6	لون المطورBسائل .	6 ملسققارورة	12	ختم حقيبة	1ص

متطلبات العينة

1العينات التي تم جمعها في أقرب وقت ممكن بعد استخراج ، استخراج حسب الأدبيات ذات الصلة ، في أقرب وقت ممكن بعد استخراج التجربة . إذا كان لا يمكن إجراء اختبار على الفور ، يمكن وضع العينة في-20الحفاظ على درجة مئوية ، ولكن ينبغي أنتجنب تكرار التجميد تحسن

2 . لا يمكن الكشف عن عينات تحتوي على nan3 لأننان 3تثبيط هورس راديش پراكسيداز )برنامج HRPنشط .

خطوات التشغيل

الرقم المرجعي : عينة المقابلة micropore مرقمة في تسلسل ، كل لوحة يجب أن تكون سلبية مقارنة2المسام ، مراقبة إيجابية2ثقب فارغة السيطرة1لا عينة أو انزيم الكواشف القياسية أضيفت إلى السيطرة على ثقب فارغة ، وغيرها من الخطوات العملية نفسها

إضافة عينات : السلبية والإيجابية في السيطرة على السيطرة على السيطرة على الثقوب ، على التوالي .50ميكرولترثمعينة اختبار حفرةإضافة عينة مخفف40ميكرولترثم نضيف عينة لفحصها10ميكرولترإضافة عينة إلى الجزء السفلي من حفرة من انزيم العلامات لوحة ، لا تلمس جدار الحفرة .بخفةهزتخلط جيدا

درجة الحرارة : بعد إغلاق لوحة مع لوحة الختم37درجة حرارة الغرفة0دقيقةمنتدى

الاستغناء عن السائل : سوف30الماء المقطر مرتين تتركز محلول الغسيل30ضعف الاحتياطي المخفف

غسل : إزالة بعناية ختم الفيلم ، والتخلص من السائل ،رمي الجافة، كل حفرة مليئة سائل الغسيل ، لا يزال قائما30ثانية في وقت لاحق ، لذلك كرر5مرات ، بات الجافة .

إضافة انزيم : إضافة انزيم الكواشف القياسية في كل حفرة50مlباستثناء الثقوب فارغةمنتدى

درجة الحرارة : نفس العملية3منتدى

غسل : نفس العملية5منتدى

اللون : لون المطور تضاف إلى كل حفرةA50مl، ثم إضافة لون المطورB50مl، يهز برفق ويخلط جيدا ،37تجنب الضوء لمدة 15 دقيقة .

إنهاء : إضافة إلى إنهاء كل حفرةسائل .50 ميكرولترإنهاء الرد( عند هذه النقطة الأزرق يقف بدوره الأصفر )منتدى

التصميم : صفر مع ثقب فارغ ،450نانومترقياس الطول الموجيامتصاص الضوءدرجة )ODالقيمة (منتدى يجب أن يكون التصميم بعد إنهاء السائل المضافة .15في غضون دقائق .

الحسابات والنتائج

فعالية : متوسط قيمة إيجابية السيطرة على ثقبأكثر1.00 ;متوسط قيمة سلبيةص0.20

القيمة الحرجة )قطعحساب : القيمة الحرجةسمتوسط قيمة سلبية السيطرة على ثقب+0.15

الحكم السلبي : عينةODالقيمةقالقيمة الحرجة )قطعالأجسام المضادة لفيروس الأنفلونزا(سيف أب)سلبي

الحكم : عينة إيجابيةODالقيمةأكثرالقيمة الحرجة )قطعالأجسام المضادة لفيروس الأنفلونزا(سيف أب)موجبمنتدى

الاحتياطات

1العملية تتم بدقة وفقا للتعليمات ، كاشف لا يمكن أن تكون مختلطة مع عدد مختلف من المكونات .

2كاشف عدة مأخوذة من البيئة المبردة يجب أن تكون متوازنة في درجة حرارة الغرفة .15-30إذا لم تستخدم بعد فتح لوحة ، لوحة يجب أن تكون معبأة في حقيبة مختومة .

3( أ )تركيز سائل الغسيلممكنسوف يكون هناكتبلوريمكن أن تكون ساخنة في حمام مائي للمساعدة في حللا تؤثر على نتيجة الغسيل .

4.ختم لوحة الفيلم يقتصر على استخدام لمرة واحدة فقط لتجنب التلوث الصليب .

5الحفاظ على الركيزة من الضوء .

6نتائج الاختبار يجب أن يكون الحكم على أساس القراءة من الانزيم ، عند استخدام مزدوج الطول الموجي للكشف عن إشارة الطول الموجي630 نانومتر

7جميع العينات ، سوائل الغسيل ، وجميع أنواع النفايات يجب أن تعامل على أنها معدية . إنهاء السائل2Mيجب الانتباه إلى السلامة عند استخدام حمض الكبريتيك .

الحفاظ على حالة صالحة

1( أ )طقم حفظ :ن2-8℃منتدى

2مدة الصلاحية :6أشهر