22rv1 ( الإنسان خلايا سرطان البروستاتا )

22rv1 ( الإنسان خلايا سرطان البروستاتا )

الاسم المستعار 22RV1؛ 22Rv-1؛ 22rV1 ؛ CWR22-Rv1؛ CWR22R-V1 ؛ CWR22-R1؛ CWR22Rv1؛ CWR22R

نوع جنس إنساني

العمر ( الجنس ) ذكورالكبار

المصدر التنظيمي البروستات

خصائص النمو خلية ملتصقة

شكل الخلية الخلايا الظهارية مثل

وصف الخلفية 22rv1 هو سرطان البروستاتا البشرية خط الخلية الظهارية المستمدة من xenotransplantation ( استمرار مرور في الفئران بعد الإخصاء التي تسبب سرطان البروستاتا و تكرار بعد الأب cwr22 تعتمد على الاندروجين التطعيم ) . مستضد البروستات محددة عن 22rv1 خط الخلية . dihydroxy هرمون تستوستيرون يحفز نمو الخلايا 22rv1 قليلا ، ثم المنتجات القابلة للذوبان و الأجسام المضادة مستقبلات الاندروجين تم الكشف عنها بواسطة لطخة غربية . لو يحفز نمو الخلايا ، ولكن تبتغي للايزومر 1 لا تمنع نمو الخلايا . 22rv1 يمكن أن تكون الأورام في الفئران عارية .

مستوى السلامة البيولوجية 2

متوسطة النمو RPMI-1640 + 10٪ FBS + 1٪ P / S

النسبة الموصى بها 1 : 3-1 : 4

أوصى السائل تغيير التردد 2-3 مرات في الأسبوع

مضاعفة الوقت ساعة

حالة التجميد

سائل التجميد55 ٪ الركيزة + 40 ٪ سلاح + 5 ٪ دمسو

درجة الحرارة : النيتروجين السائل

حالة ثقافة

مرحلة الغاز : الهواء ،95%； ثاني أكسيد الكربون، 5 في المائة

درجة الحرارة37℃

ورم نعم، تشكل أورام في الفئران العارية.

التعبير عن مستقبلات مستقبل الأندروجين

ملاحظة إن 22rv1 الخلايا تحتاج إلى إزالة DMSO بالطرد المركزي أثناء الإنعاش . في المرحلة الأولى من الانتعاش ، cryopreserved الخلايا ، مع عدد أقل من الالتصاق و مجموعات فضفاضة من الالتصاق ، ولكن في نهاية المطاف سوف تسطيح وتنتشر في طبقة واحدة جيدة ، والتي سوف تستغرق 4-5 أيام . الخلايا تنمو ببطء ، يمكن أن تنمو فقط إلى 90 ٪ من التقارب . معدل البقاء على قيد الحياة من الخلايا المستزرعة بعد الحفظ بالتبريد ليست عالية ، نسبة 90 ٪ مصل + 10 ٪ DMSO الموصى بها .

ملاحظة :

1 ، بعد تلقي الخلايا ، إذا وجدت أن الثلج الجاف قد تبخرت نظيفة ، غطاء زجاجة التخزين البارد تقشير ، تلف الخلايا الملوثة ، يرجى الاتصال بنا على الفور .

2 ، الحصول على الخلايا لا تفتح غطاء زجاجة ، زجاجة الجسم مسح الكحول بعد وضعها في حاضنة لمدة 2-4 ساعات ( اعتمادا على كثافة الخلية ) لتحقيق الاستقرار في حالة الخلية . ثم لاحظ نمو الخلايا تحت المجهر المقلوب ، ثم أخذ صور متعددة من الخلايا ( من المستحسن أن تأخذ صورة من المظهر العام عند استلام الخلايا ، ومراقبة ما إذا كانت الثقافة المتوسطة اللون و تسرب السائل ، ثم أخذ صورة من الخلايا تحت المجهر ، 100 * 200 * على التوالي ) لمراقبة وتسجيل ما إذا كانت الخلايا الملوثة أثناء النقل . كأساس لدينا بيع .

3 ، لأن حالة الخلية تتأثر بالعديد من العوامل ، مثل البيئة ، عملية ، والنقل ، وما إلى ذلك ، فإن الشركة لا تضمن إلا أن العملاء الحصول على الخلايا في غضون أسبوع واحد من حالة الخلية ، لذلك يحتاج العملاء إلى إنتاج ما بعد البيع من الوقت للحصول على شهادة من الخلايا والعملاء لتوفير الوقت بعد استلام البضائع و العثور على مشاكل في وقت الاتصال بين موظفي خدمة العملاء ، الفاصل الزمني لا يمكن أن يكون أكثر من 7 أيام .

4 ، جميع الخلايا الحيوانية تعتبر المخاطر البيولوجية المحتملة ، يجب أن تعمل في المرحلة الثانية من السلامة البيولوجية منصة ، يرجى الانتباه إلى الحماية ، جميع النفايات السائلة و الأواني التي تأتي في اتصال مع هذه الخلية تحتاج إلى تعقيم قبل التخلص منها .

معالجة الخلايا

1 ) تجميد خلية الإنعاش : تجميد خلية تحتوي على 1 مل تعليق أنبوب في حمام مائي في 37 ℃ يهز بسرعة وذوبان ، إضافة إلى 4-6 مل متوسطة تحتوي على أنابيب الطرد المركزي مختلطة بالتساوي . في 1000 دورة في الدقيقة ، الطرد المركزي لمدة 3-5 دقائق ، supernatants كانت مهجورة و الخلايا المتوسطة كانت معلقة مرة أخرى . تعليق خلية ثم أضيفت إلى قارورة تحتوي على 6-8ml متوسطة الثقافة ( أو طبق ) لمدة ليلة في 37 ℃ . . . . . . . نمو الخلايا و كثافة الخلية لوحظ تحت المجهر في اليوم التالي .

2 ) مرور الخلية : إذا كانت كثافة الخلية تصل إلى 70 ٪ - 90 ٪ ، يمكن أن تحمل على مرور الثقافة . هذه الخلايا هي خلايا ملتصقة تعليق طفيف ، ويمكن أن يكون مرور المشار إليها في الطرق التالية :

1 ، جمع : تعليق خلية ثقافة زجاجة جمع في أنبوب الطرد المركزي . برنامج تلفزيوني الخلايا تغسل 1-2 مرات دون الكالسيوم والمغنيسيوم الأيونات . برنامج تلفزيوني يجب أن تعاد إلى أنبوب الطرد المركزي لأن الخلايا لا تعلق على الجدار بعد غسلها .

2 - إضافة 0.25 في المائة ( ث / ت ) 0.53 ملم EDTA في الثقافة زجاجة ( T25 زجاجة 1-2 مل ، T75 زجاجة 2-3 مل ) في 37 ℃ حاضنة الهضم لمدة 1-2 دقيقة ( عسر الهضم الخلايا يمكن أن تطيل فترة الهضم بشكل صحيح ) ، ثم لاحظ تحت المجهر الهضم الخلوي ، إذا كان معظم الخلايا تصبح الجولة و تقشر بسرعة العودة إلى طاولة العمليات ، اضغط على عدة مرات بعد إضافة ثقافة زجاجة تحتوي على 10 ٪ FBS الهضم متوسطة لإنهاء .

3 ، وجمع تعليق الخلايا ، الخلايا في تنظيف السائل PBS وهضم خلايا ملتصقة مع 1000rpml الطرد المركزي لمدة 5 دقائق ، التخلص من طاف ، إضافة 1-2ml متوسطة الثقافة ، ثم إعادة تعليق موحد ، تعليق خلية مقسمة حسب نسبة 1 : 2 في زجاجة جديدة T25 ، إضافة 6-8ml وفقا لمتطلبات تعليمات تكوين وسائل الإعلام الجديدة للحفاظ على نمو الخلايا على قيد الحياة ، بعد مرور وفقا للحالة الفعلية من 1 : 2-1 : 5 نسبة .

cryopreserved الخلايا : بعد تلقي الخلايا ، فمن المستحسن أن cryopreserved دفعة من بذور الخلايا في أول 3 أجيال من الثقافة لاستخدامها في التجارب اللاحقة . وفيما يلي أمثلة من زجاجات T25 :

1 ، الخلية بالتبريد وفقا لعملية مرور الخلية جمع الخلايا المهضومة في أنبوب الطرد المركزي ، يمكن استخدام خلايا الدم لوحة العد العد لتحديد كثافة الخلية بالتبريد . أوصت بالتبريد كثافة الخلايا العادية 1 × 10 ~ 1 × 10 خلايا حية / مل .

2 ، 1000rpm الطرد المركزي 3-5min ، وإزالة طاف . تعليق الخلايا في خلية واحدة cryopreserved الحل ، كل 1 مل من cryopreserved الحل يحتوي على 1 × 10 ~ 1 × 10 / مل من الخلايا الحية في واحدة cryopreserved أنبوب .

3 ، سيتم تجميد الخلايا المخزنة في برنامج التبريد مربع ، الثلاجة - 80 درجة بين عشية وضحاها ، ثم نقلها إلى النيتروجين السائل الحاويات للتخزين . وفي الوقت نفسه ، فإن الموقف من تجميد تخزين الأنابيب في النيتروجين السائل حاوية يتم تسجيلها من أجل متابعة التفتيش والاستخدام .

خطوات التشغيل :

الخطوة 1 : إزالة المصل خالية من غير برنامج تجميد السائل من الثلاجة ، في انتظار

الخطوة 2 : جمع الخلايا في مرحلة النمو لوغاريتمي بالطرد المركزي ( هضم الخلايا الملتصقة بالطرد المركزي ، الطرد المركزي مباشرة من تعليق الخلايا ، سرعة دوران 1200rpm أو 250 جرام ، الوقت 3 دقائق )

الخطوة 3 : التخلي عن supernatants ، إضافة كمية مناسبة من المصل خالية من nonprogrammed بالتبريد

الخطوة 4 : حزمة في تجميد تخزين الأنابيب حسب كمية 1 ~ 1.5ml / الأنابيب ، وتشديد غطاء الأنابيب ، وجعل علامة

الخطوة 5 : نقل أنبوب التخزين المجمد مباشرة إلى - 80 ℃ الثلاجة ، ونقل إلى النيتروجين السائل بعد 24 ساعة من التخزين على المدى الطويل

دليل التدرج في درجة الحرارة يمكن أن يكون اختياريا في حالة عدم وجود صناديق أو غير المبرمجة التجميد . ومع ذلك ، دليل التدرج التبريد لا تنطبق على جميع الخلايا ، وتأثير غير مستقر ، نفس الحاجة إلى القيام بالتبريد الاختبار .

منتجات الشركة للبيع :

سرطان الدم الليمفاوي الحاد ، سرطان الدم الليمفاوي الحاد ، سرطان الدم الليمفاوي الحاد

A9 ( الماوس تحت الجلد خلايا النسيج الضام )

aav-293 ( الإنسان الجنينية خلايا الكلى )

( الإنسان اللعابية وسرطان غداني الكيسي acc-2 الخلية )

( الإنسان خلايا غدية الكلى ACHN )

AGS ( المعدة البشرية خلية غدية )

انا 1 ( الماوس الضامة )

الإنسان خلايا سرطان المبيض

الفئران خلايا إفرازية البنكرياس

arpe-19 ( الإنسان الخلايا الظهارية الشبكية )

aspc-1 ( الإنسان خلايا غدية البنكرياس المنتشر )

att-20 ( الماوس خلايا ورم في الغدة النخامية )

B16 ( الماوس خلايا سرطان الجلد )

bcap-37 ( الإنسان خلايا سرطان الثدي )

bel-7402 ( الإنسان خلايا سرطان الكبد )

خنزير الأمعاء البرسيم عامل( ITF ) طقم إليسا 96t

اللمفاوي البشريسو بيتا ( LTB ) طقم إليسا

خنزير انترلوكينSU3 ( IL - 3 ) طقم إليسا

الهامستر مصفوفة الفلزيإليسا عدة mi9 / الجيلاتين mib MMP - 9 / gelatinase ب

الخنازير فيروس الأذن الزرقاءRT - PCR كيت

الحفش الأبيض ایریدوویروسبكر كيت

أذن البحر فيروسبكر كاشف عدة

الشعية الداخليةبكر كاشف عدة

آرليت المكورات العنقوديةبكر كيت

هيستوبلازم العامبكر كيت

النباتات المعدلة وراثيابات جين PCR كيت

22rv1 ( الإنسان خلايا سرطان البروستاتا )آرليت المكورات العنقوديةبكر كيت

RT-1 الظباء فيروس الهربس نوع 1 طقم إليسا

التريبانوسومابكر كيت

فيروس حمى الخنازير الأفريقيةبكر كاشف عدة