293 ( hek-293 الخلايا الكلوية الجنينية البشرية )

293 ( hek-293 الخلايا الكلوية الجنينية البشرية )

الاسم المستعارهيك 293 ; هيك - 293 ; حسام هرتز : 293 ; 293 ; 293 هكتارا؛ الكلى الجنينية البشرية

مخطط الثقافة ( الافتراضي )

نمو وسائل الإعلام :

ميم ( ATCC تعديل ) + 10 ٪ FBS + 1 ٪ ع / س

شروط التدريب :

المرحلة الغازية : الهواء ، 95 ٪ ؛ CO2， 5 ٪ ، درجة الحرارة : 37 درجة مئوية

ملاحظةهذه الخلية هو فضفاض على الجدار ، من فضلك حاول أن تكون لينة قدر الإمكان . سخن متوسطة عند تغيير السائل . إذا كان هناك كتلة كبيرة من الخلايا التي تسقط من استلام البضائع ، هو ظاهرة طبيعية ، يرجى اتباع الاحتياطات الواردة في التعامل معها .

المراجع ( المصدر )

الخلفية يصف خلد الخلايا التي شكلتها transfected الجنينية البشرية خلايا الكلى مع قص اتش 5 ( ad5 ) تحتوي على التعبير عن transfected ad5 الجينات . التقارير السابقة تشير إلى أن هناك الحمض النووي في الجانب الأيسر والجانب الأيمن من adenovirus 5 ( ad5 ) الجينوم ، ولكن الآن من الواضح أن هناك فقط الجانب الأيسر من الحمض النووي . من خلال الاستنساخ وتسلسل ad5 نقطة الإدراج ، وجدنا أن 1-4344 خطي النوكليوتيدات ad5 تم دمجها في كروموسوم 19 ( 19q13.2 ) . وهو يتألف من إنتغرين β 1 وحدة و مستقبلات α - V وحدة .

العمر ( الجنس )جنين

المصدر التنظيميالكلى تحويل اتش 5 الحمض النووي

أنواع الخلاياتحويل خط الخلية

مستوى السلامة البيولوجيةBSL - 2

مضاعفة الوقت~ 24-30 ساعة

ورمنعم، تشكل أورام في الفئران العارية.

التعبير عن مستقبلاتفيترونيكتين

الحفاظ على آليةATCC؛ CRL-1573 ATCC: PTA-4488 DSMZ: ACC-305 ECACC: 85120602

معالجة الخلايا

1 ) تجميد خلية الإنعاش : تجميد خلية تحتوي على 1 مل تعليق أنبوب في حمام مائي في 37 ℃ يهز بسرعة وذوبان ، إضافة إلى 4-6 مل متوسطة تحتوي على أنابيب الطرد المركزي مختلطة بالتساوي . في 1000 دورة في الدقيقة ، الطرد المركزي لمدة 3-5 دقائق ، supernatants كانت مهجورة و الخلايا المتوسطة كانت معلقة مرة أخرى . تعليق خلية ثم أضيفت إلى قارورة تحتوي على 6-8ml متوسطة الثقافة ( أو طبق ) لمدة ليلة في 37 ℃ . . . . . . . نمو الخلايا و كثافة الخلية لوحظ تحت المجهر في اليوم التالي .

2 ) مرور الخلية : إذا كانت كثافة الخلية تصل إلى 70 ٪ - 90 ٪ ، يمكن أن تحمل على مرور الثقافة . هذه الخلايا هي خلايا ملتصقة تعليق طفيف ، ويمكن أن يكون مرور المشار إليها في الطرق التالية :

1 ، جمع : تعليق خلية ثقافة زجاجة جمع في أنبوب الطرد المركزي . برنامج تلفزيوني الخلايا تغسل 1-2 مرات دون الكالسيوم والمغنيسيوم الأيونات . برنامج تلفزيوني يجب أن تعاد إلى أنبوب الطرد المركزي لأن الخلايا لا تعلق على الجدار بعد غسلها .

2 - إضافة 0.25 في المائة ( ث / ت ) 0.53 ملم EDTA في الثقافة زجاجة ( T25 زجاجة 1-2 مل ، T75 زجاجة 2-3 مل ) في 37 ℃ حاضنة الهضم لمدة 1-2 دقيقة ( عسر الهضم الخلايا يمكن أن تطيل فترة الهضم بشكل صحيح ) ، ثم لاحظ تحت المجهر الهضم الخلوي ، إذا كان معظم الخلايا تصبح الجولة و تقشر بسرعة العودة إلى طاولة العمليات ، اضغط على عدة مرات بعد إضافة ثقافة زجاجة تحتوي على 10 ٪ FBS الهضم متوسطة لإنهاء .

3 ، وجمع تعليق الخلايا ، الخلايا في تنظيف السائل PBS وهضم خلايا ملتصقة مع 1000rpml الطرد المركزي لمدة 5 دقائق ، التخلص من طاف ، إضافة 1-2ml متوسطة الثقافة ، ثم إعادة تعليق موحد ، تعليق خلية مقسمة حسب نسبة 1 : 2 في زجاجة جديدة T25 ، إضافة 6-8ml وفقا لمتطلبات تعليمات تكوين وسائل الإعلام الجديدة للحفاظ على نمو الخلايا على قيد الحياة ، بعد مرور وفقا للحالة الفعلية من 1 : 2-1 : 5 نسبة .

cryopreserved الخلايا : بعد تلقي الخلايا ، فمن المستحسن أن cryopreserved دفعة من بذور الخلايا في أول 3 أجيال من الثقافة لاستخدامها في التجارب اللاحقة . وفيما يلي أمثلة من زجاجات T25 :

1 ، الخلية بالتبريد وفقا لعملية مرور الخلية جمع الخلايا المهضومة في أنبوب الطرد المركزي ، يمكن استخدام خلايا الدم لوحة العد العد لتحديد كثافة الخلية بالتبريد . أوصت بالتبريد كثافة الخلايا العادية 1 × 10 ~ 1 × 10 خلايا حية / مل .

2 ، 1000rpm الطرد المركزي 3-5min ، وإزالة طاف . تعليق الخلايا في خلية واحدة cryopreserved الحل ، كل 1 مل من cryopreserved الحل يحتوي على 1 × 10 ~ 1 × 10 / مل من الخلايا الحية في واحدة cryopreserved أنبوب .

3 ، سيتم تجميد الخلايا المخزنة في برنامج التبريد مربع ، الثلاجة - 80 درجة بين عشية وضحاها ، ثم نقلها إلى النيتروجين السائل الحاويات للتخزين . وفي الوقت نفسه ، فإن الموقف من تجميد تخزين الأنابيب في النيتروجين السائل حاوية يتم تسجيلها من أجل متابعة التفتيش والاستخدام .

خطوات التشغيل :

الخطوة 1 : إزالة المصل خالية من غير برنامج تجميد السائل من الثلاجة ، في انتظار

الخطوة 2 : جمع الخلايا في مرحلة النمو لوغاريتمي بالطرد المركزي ( هضم الخلايا الملتصقة بالطرد المركزي ، الطرد المركزي مباشرة من تعليق الخلايا ، سرعة دوران 1200rpm أو 250 جرام ، الوقت 3 دقائق )

الخطوة 3 : التخلي عن supernatants ، إضافة كمية مناسبة من المصل خالية من nonprogrammed بالتبريد

الخطوة 4 : حزمة في تجميد تخزين الأنابيب حسب كمية 1 ~ 1.5ml / الأنابيب ، وتشديد غطاء الأنابيب ، وجعل علامة

الخطوة 5 : نقل أنبوب التخزين المجمد مباشرة إلى - 80 ℃ الثلاجة ، ونقل إلى النيتروجين السائل بعد 24 ساعة من التخزين على المدى الطويل

دليل التدرج في درجة الحرارة يمكن أن يكون اختياريا في حالة عدم وجود صناديق أو غير المبرمجة التجميد . ومع ذلك ، دليل التدرج التبريد لا تنطبق على جميع الخلايا ، وتأثير غير مستقر ، نفس الحاجة إلى القيام بالتبريد الاختبار .

ملاحظة :

1 ، بعد تلقي الخلايا ، إذا وجدت أن الثلج الجاف قد تبخرت نظيفة ، غطاء زجاجة التخزين البارد تقشير ، تلف الخلايا الملوثة ، يرجى الاتصال بنا على الفور .

2 ، الحصول على الخلايا لا تفتح غطاء زجاجة ، زجاجة الجسم مسح الكحول بعد وضعها في حاضنة لمدة 2-4 ساعات ( اعتمادا على كثافة الخلية ) لتحقيق الاستقرار في حالة الخلية . ثم لاحظ نمو الخلايا تحت المجهر المقلوب ، ثم أخذ صور متعددة من الخلايا ( من المستحسن أن تأخذ صورة من المظهر العام عند استلام الخلايا ، ومراقبة ما إذا كانت الثقافة المتوسطة اللون و تسرب السائل ، ثم أخذ صورة من الخلايا تحت المجهر ، 100 * 200 * على التوالي ) لمراقبة وتسجيل ما إذا كانت الخلايا الملوثة أثناء النقل . كأساس لدينا بيع .

3 ، لأن حالة الخلية تتأثر بالعديد من العوامل ، مثل البيئة ، عملية ، والنقل ، وما إلى ذلك ، فإن الشركة لا تضمن إلا أن العملاء الحصول على الخلايا في غضون أسبوع واحد من حالة الخلية ، لذلك يحتاج العملاء إلى إنتاج ما بعد البيع من الوقت للحصول على شهادة من الخلايا والعملاء لتوفير الوقت بعد استلام البضائع و العثور على مشاكل في وقت الاتصال بين موظفي خدمة العملاء ، الفاصل الزمني لا يمكن أن يكون أكثر من 7 أيام .

4 ، جميع الخلايا الحيوانية تعتبر المخاطر البيولوجية المحتملة ، يجب أن تعمل في المرحلة الثانية من السلامة البيولوجية منصة ، يرجى الانتباه إلى الحماية ، جميع النفايات السائلة و الأواني التي تأتي في اتصال مع هذه الخلية تحتاج إلى تعقيم قبل التخلص منها .
منتجات الشركة للبيع :

الهيكل العظمي والعضلات الليفية الماوس5 × 10 خلايا / T25 قارورة

الماوس اوليگودندروسيتها الخلايا الاصلية5 × 10 خلايا / T25 قارورة

رات اوليگودندروسيتها الخلايا الاصلية5 × 10 خلايا / T25 قارورة

الماوس نخاع العظم الخلايا الجذعية المكونة للدم5 × 10 خلايا / T25 قارورة

الفئران غضروفية القصبة الهوائية5 × 10 خلايا / T25 قارورة

الخلايا الليفية الماوس اللثة5 × 10 خلايا / T25 قارورة

الخلايا الليمفاوية في الدم المحيطي من الفئران5 × 10 خلايا / T25 قارورة

الفئران خلايا العضلات الملساء المساريقي5 × 10 خلايا / T25 قارورة

الشريان السباتي الفئران خلايا العضلات الملساء الوعائية5 × 10 خلايا / T25 قارورة

الماوس خلايا حليمة5 × 10 خلايا / T25 قارورة

الخلايا الجذعية الوسيطة ، وفاق سطيف5 × 10 خلايا / T25 قارورة

الماوس الخلايا العصبية5 × 10 خلايا / T25 قارورة

الخلايا الجذعية العصبية في الحبل الشوكي ، NSCs5 × 10 خلايا / T25 قارورة

الخلايا الجذعية الجنينية الماوس5 × 10 خلايا / T25 قارورة

رات مثلث التوائم الخلايا العصبية5 × 10 خلايا / T25 قارورة

الماوس خلايا الشبكية الاوعية الدموية الدقيقة5 × 10 خلايا / T25 قارورة

رات لب الأسنان الخلايا الجذعية5 × 10 خلايا / T25 قارورة

الماوس نخاع العظم الخلايا وحيدة النواة5 × 10 خلايا / T25 قارورة

رات القضيب الخلايا الليفية غشاء أبيض5 × 10 خلايا / T25 قارورة

الماوس مثلث التوائم الخلايا العصبية5 × 10 خلايا / T25 قارورة

الفئران خلايا البصلة الشمية5 × 10 خلايا / T25 قارورة

الخلايا الليفية الماوس جدار المهبل5 × 10 خلايا / T25 قارورة

رات الحقي غضروفية5 × 10 خلايا / T25 قارورة

293 ( hek-293 الخلايا الكلوية الجنينية البشرية ) الماوس خلايا الساق5 × 10 خلايا / T25 قارورة

رات الخلايا العصبية5 × 10 خلايا / T25 قارورة

الماوس الصلبة الليفية5 × 10 خلايا / T25 قارورة

الخلايا الجذعية الجنينية في الفئران5 × 10 خلايا / T25 قارورة