afdye 555 NHS أستر خلية تلطيخ

AFDye 555 NHS إستر

(أليكسا فلور 555 NHS استر مكافئ)

معلومات المنتج

وصف المنتج

afdye 555 هو نوع من الأصباغ التي هي للذوبان في الماء ، وعلى ضوء قوي الاستقرار . afdye 555 هو البرتقالي صبغة الفلورسنت التي يمكن أن تكون متحمس من 488nm أو 532nm الليزر . هو بديل أو tetramethyl رودامين CY3 ، وعلى ضوء الاستقرار في الخلايا الحية والثابتة أفضل من CY3 . . . . . . . التسامح قوية في درجة الحموضة تتراوح من 4 إلى 10 .

afdye555 NHS ester ( equivalent toalexa floor 555 NHS ester ) هو رد فعل أمين ، البرتقالي صبغة الفلورسنت ، وعادة من خلال العلامات الأولية أمين البروتين أو الأجسام المضادة ، ببتيد ، أمين تعديل قليل النوكليوتيد ، وغيرها من الجزيئات البيولوجية التي تحتوي على أمين المجموعة . هذه العلامات عادة ما تكون فعالة في درجة الحموضة 7-9 مجموعة زوي ، وتشكيل مستقرة و تساهمي أميد السندات .

خصائص المنتج

الحفاظ على وسائل النقل

الحفاظ على : 20 درجة مئوية لتجنب الضوء والتجفيف ، صالحة لمدة 2 سنوات .

: النقل بالشاحنات .

ملاحظة

1 ) جميع الأصباغ الفلورية لديها مشاكل التبريد ، يرجى الانتباه إلى تجنب الضوء قدر الإمكان ، من أجل إبطاء التبريد الفلورية .

على الرغم من أن afdye NHS ester سلسلة الأصباغ للذوبان في الماء ، فمن المستحسن أن DMSO DMF يمكن استخدامها لإعداد الأم الخمور . لأن هذه المجموعات المتفاعلة يمكن بسهولة أن تحلل في نظام المياه القابلة للذوبان في شكل حر غير رد الفعل حمض .

3 ) من أجل سلامتك وصحتك ، يرجى ارتداء ملابس المختبر وارتداء القفازات القابل للتصرف للتشغيل .

تلطيخ خطوة ( مع علامة المناعي مفتش على سبيل المثال )

تقريبا جميع البروتينات أو البروتينية يمكن وصفها مع أمين فعل كاشف ( التحقيق ) . وفيما يلي الخطوات الأمثل لوضع العلامات على الأجسام المضادة IgG . يمكن للمستخدم تكبير أو تقليل رد فعل النظام وفقا لكمية من البروتين ، ولكن من أجل الحصول على نتيجة مرضية ، تركيز البروتين لا ينبغي أن يكون أقل من 2 مغ / مل . لأن هناك فرق كبير في عدد المجموعات الأمينية في مختلف البروتينات ( ببتيد ) وموقف المجموعات الأمينية على السطح ، فمن المستحسن أن المستخدمين إنشاء ثلاث مجموعات مختلفة من الكواشف رد فعل أمين : النسبة المولية من البروتين في التجربة الأولى ، وذلك لتحديد النسبة المولية التي يمكن أن تصل إلى كفاءة zuijia العلامات .

1-1 ~ 10mg البروتين يذوب تماما في 1 مل 0.1m كارسون الهيدروجين الصوديوم العازلة .

ملاحظةتركيز البروتين هو عادة 5-20mg / مل ، معدل نجاح اقتران يعتمد على تركيز البروتين . عندما يكون تركيز أقل من 2 ملغ / مل ، وسم الكفاءة سوف تتأثر بشدة .

الملاحظة الثانيةنظام العلامات يجب تجنب أي الركيزة التي تحتوي على أمين ، مثل تريس ، جليكاين ، ملح الأمونيوم ، أو غيرها من البروتينات مستقرة مثل جيش صرب البوسنة ، وما إلى ذلك ، إذا كان حل البروتين المسمى يحتوي على المواد المذكورة أعلاه من التلوث ، تحتاج إلى غسيل الكلى إلى 10-20 ملم الفوسفات عازلة ( برنامج تلفزيوني ) ، ثم إضافة 0.1 مل من بيكربونات عازلة ( الرقم الهيدروجيني 8.3-9.0 ) لكل مل من البروتين الحل المطلوب قيمة الرقم الهيدروجيني .

ملاحظةانخفاض تركيز أزيد الصوديوم ( أقل من 3 ملم ) أو الكبريت والزئبق ( أقل من 1 ملم ) في حل الأجسام المضادة لا تتداخل مع وضع العلامات .

1-2 استخدام عالية الجودة اللامائية DMF أو DMSO حل أمين فعل كاشف ( التحقيق ) ( على سبيل المثال : afdy555 NHS ester ) إلى 10 ملغ / مل .

ملاحظة ① محلول مائي من afdye 488 NHS ester يجب أن تستخدم الآن ، لا يمكن الحفاظ عليها ، لأنه في محلول مائي ، يمكن أن تحلل في غير نشط الأحماض الحرة . DMSO تخزين السائل من afdye 488 NHS ester يمكن تخزينها في ≤ - 20 ℃ . . . . . . .

1-3 مع التحريك أو الدوامة حل البروتين ، 50-100 ميكروغرام ل أمين الكاشف ( التحقيق ) أضيفت ببطء .

ملاحظة : ( 1 ) إضافة أمين كاشف ( التحقيق ) في 0.5-1 مغ ، وعموما ، حوالي 1 / 4-1 / 3 من أمين كاشف رد الفعل سوف تكون مرتبطة إلى البروتين . البروتينات المختلفة وسم الكواشف لها تأثيرات مختلفة على العلامات ، يرجى تحسين النسب وفقا للظروف المحددة .

1-4 احتضان لمدة 1 ساعة ( أو أكثر ) في درجة حرارة الغرفة مع التحريك ببطء لتجنب الضوء .

1-5 [ اختياري ] 1.5m Hydroxylamine ( الرقم الهيدروجيني 8.5 ) التي أعدت حديثا مع 0.1ml أضيفت إلى إنهاء رد الفعل و احتضان Hydroxylamine تحتوي على نظام في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة واحدة .

1-6 تنقية : اختيار طريقة مناسبة ( على سبيل المثال ، غسيل الكلى ، p-30 أو pd-10 العمود ) لتنقية المسمى المنتج ، وإزالة أيونات الملح أو رد فعل أمين الكواشف .

1-7 التخزين : الحفاظ على البروتين المسمى في 2-8 ℃ . . . . . . . إذا كان تركيز تنقية البروتين كونجوجاتيس أقل من 1 ملغ / مل ، جيش صرب البوسنة أو غيرها من البروتينات مستقرة تضاف 1-10 ملغ / مل . في وجود أزيد الصوديوم ، 2-8 ℃ يمكن تخزينها لعدة أشهر . إذا كنت بحاجة إلى الحفاظ على لفترة أطول ، يجب أن تكون معبأة في - 20 ℃ لتجنب تكرار التجميد والذوبان .

حساب نسبة ( و / ع )

بالنسبة لمعظم الأجسام المضادة مثل الغلوبولين المناعي مفتش ، معامل الامتصاص المولي هو 203000 و / ع قيمة بين 4 و 9 هو الأكثر ملاءمة .
2.1afdye555 المسمى البروتين و / ع القيمة المحسوبة :
1 ) امتصاص الضوء من 280nm و 555nm تم قياسها في 1 سم طبق اللونية باستخدام برنامج تلفزيوني دقيقة متعددة تمييع كمية صغيرة من تنقية البروتين كونجوجاتيس . . . . . . .
2 ) حساب تركيز البروتين في العينة : التركيز المولي للبروتين = ( a280 - ( a555 × 0.08 ) ) * تخفيف متعددة / 203000
3 ) حساب نسبة العلامات : الخلد عدد الأصباغ في الخلد ملزمة البروتين = a555 × تخفيف متعددة / ( 150 × تركيز البروتين الخلد )

منتجات ذات صلة

- كتابة / تحرير من قبل v.shallan [ جميع الحقوق محفوظة MKBIO ماو كانغ ]

شنغهاي Maokang التكنولوجيا الحيوية المحدودة هي شركة تعمل في مجال علوم الحياة والتكنولوجيا الحيوية في مجال البحوث والكواشف والأجهزة والمواد الاستهلاكية مختبر الخدمات التجريبية ، تعمل اساسا في مجال بيولوجيا الخلية ، علم النبات ، علم الأحياء الجزيئي ، علم المناعة ، الكيمياء الحيوية ، البروتيوميات . الصيدلانية البيولوجية والكواشف التشخيصية البحث والتطوير والإنتاج . الشركة يلتصق إلى ال " الناس المنحى ، والصدق والثقة العقد " فلسفة العمل . التمسك بمبدأ " ضمان الجودة " لتزويد عملائنا مع منتجات ذات جودة عالية .