المضادة للالتهابات تأثير مستحضرات التجميل في المختبر

المضادة للالتهابات تأثير مستحضرات التجميل في المختبر

مبدأ الكشف و بناء نموذج تجريبي

في المختبر المضادة للالتهابات تأثير مستحضرات التجميل على أساس lipopolysaccharide ( LPS ) بفعل التهاب الضامة نموذج تم الكشف عنها . في هذه الدراسة ، 264.7 الخام الماوس الضامة وحيدات اختير كنموذج الخلية ، والتي يمكن أن تحفز NF - κ B مسار الإشارات ، والإفراج عن كمية كبيرة من أكسيد النيتريك ( NO ) ، انترلوكين 6 ( IL - 6 ) و عامل نخر الورم ألفا ( TNF - α ) وغيرها من الوسطاء التحريضية ، والإفراج عن مستوى ارتباطا إيجابيا مع درجة الالتهاب .

المعالم الرئيسية لبناء النموذج :

كثافة الخلية التلقيح : 5 × 10 الخلايا / المسام ( 96 لوحة المسام )

تركيز LPS : 1 ميكروغرام / مل ( سيغما الدريتش l2630 ) .

وقت المعالجة : 24 ساعة بعد المعالجة مع لبس

مراقبة إيجابية : ديساي ( 1 μ mol / لتر ، تثبيط قيم أكثر من 80 ٪ )

في هذه التجربة ، 5 تركيزات التدرج ( 0.01 ٪ ~ 1 ٪ ) و مجموعة مراقبة فارغة يجب أن تكون المنشأة .

اختبار المؤشرات الأساسية ومنهجية التحقق

تحديد أكسيد النيتريك ( NO ) الإصدار

محتوى النتريت في أي أيض طاف الخلية تم الكشف عنها بواسطة كاشف غرينس اللون ( سيغما الدريتش g4410 ) . وتشمل عملية الاختبار :

عينة المعالجة : 50 μ ل طاف مختلطة مع isovolume غريس كاشف

ظروف الحضانة : 37 ℃ 15 دقيقة

أداة الاختبار : تحديد الامتصاصية في 540nm الطول الموجي

طرق الحساب : تركيز شركات حسبت مع منحنى القياسية ( 0-100 μ mol / لتر ) من الصوديوم subxiao ، تثبيط الالتهاب قيم = ( نموذج مجموعة - مجموعة اختبار يعني ) / ( نموذج مجموعة - مجموعة فارغة يعني ) × 100 ٪

متطلبات منهجية التحقق : معيار منحنى ص < > 0.99 . اليوم دقة تحديد المواقع أقل من 5 ٪ ، ومعدل الاسترداد هو 90 ٪ ~ 110 ٪ .

الكشف عن مستويات IL - 6 / TNF - α

مزدوجة ساندويتش الضد إليسا ( r & d-systems إليسا كيت ) كان يعمل على النحو التالي :

كشف مجموعة من IL - 6 : 7.8 ~ 500pg / مل ، الحد الأقصى للكشف عن دي 3.9pg / ml

كشف مجموعة من TNF - α : 15.6 ~ 1000pg / مل ، الحد الأقصى للكشف عن دي 7.8pg / ml

الخطوات العملية : عينة تمييع ، إضافة عينة الحضانة ، غسل لوحة ، انزيم العلامات اثنين من الأجسام المضادة ملزمة ، مما يجعل اللون ( TMB ) الركيزة ، إنهاء رد الفعل ( 2mol / لتر h ₂ so ₄ ) → 450nm القراءة

متطلبات البيانات : مستويات IL - 6 / TNF - α في المجموعة التجريبية كانت أقل من 30 ٪ من تلك الموجودة في نموذج مجموعة ، والفرق كبير ( اختبار ( ت ) من عينة مستقلة . p<0.05)

معيار أساس نظام مراقبة الجودة

اختبار الامتثال الصارم لمنظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي tg442e ( 2018 ) " تهيج الجلد / التآكل في المختبر طريقة الاختبار " و GB / T 35892-2018 " مستحضرات التجميل في المختبر تهيج الجلد 3D نموذج اختبار الأسلوب . وتشمل تدابير مراقبة الجودة الرئيسية ما يلي :

خط الخلية المصادقة : الخام 264.7 الخلايا ( atcc tib-71 ) التي تم تحديدها من قبل شارع

lipopolysaccharide ( LPS ) الذيفان الداخلي النشاط ≥ 1 × 10 ⁶ الاتحاد الأوروبي / ملغ ، و معامل الاختلاف في عدة إليسا < 10 ٪

السيطرة على البيئة : المشارك ₂ حاضنة ( 37 ℃ ± 0.5 ℃ ، 5 ٪ CO ₂ ) ، سوبر نظيفة الجدول ( ايزو الصف 5 )

صحة البيانات : 3 ثقوب في كل تركيز ، تكرار التجربة 3 مرات ، معامل الاختلاف في المجموعة أقل من 15 ٪ .

عملية الاختبار والنتائج معايير الحكم

كامل عملية تجريبية

إعداد الخلايا : 264.7 الخام الخلايا المستردة ، ومثقف في dmem متوسطة تحتوي على 10 ٪ مصل بقري جنيني

العلاج : مستحضرات التجميل عينة مخففة إلى تركيز محدد من قبل وسائل الإعلام ، و 0.22

تحريض التهابي : لبس ( التركيز النهائي 1 ميكروغرام / مل ) أضيفت إلى تحفيز 24 ساعة .

تزامن تحديد أي ( غريس ) و IL - 6 / TNF - α ( إليسا )

تحليل البيانات : استخدام الرسم البياني prism 9.0 للقيام التحليل الإحصائي ، وحساب قيمة جيم

معايير تحديد النتائج

ملاحظة : معدل تثبيط أي أكثر من 50 ٪ ، معدل تثبيط IL - 6 / TNF - α أكثر من 40 ٪ .

اختبار القدرات التقنية

CNOKE مختبرات اختبار معتمدة من قبل برنامج أكاديمية سيسكو ( شهادة رقم l22006 ) ، مع الكمال في المختبر المضادة للالتهابات اختبار منصة التكنولوجيا ، بما في ذلك :

نظام الكشف عن عوامل متعددة : luminex xmap 200 ( 10 أنواع من العوامل الالتهابية يمكن الكشف عنها في وقت واحد )

ارتفاع محتوى التصوير : بيركين إلمر Operetta CLS ( cytomorphology التحليل )

أتمتة محطة العمل : بيكمان بيوميك 4000 ( عينة ما قبل المعالجة )

أكثر من 500 دفعات من مستحضرات التجميل المضادة للالتهابات اختبار البنود التي تم الانتهاء منها في المختبر في السنوات الثلاث الماضية ، بما في ذلك شكل جرعات من كريم ، جوهر السائل ، قناع الوجه ، الخ . حالة نموذجية أظهرت أن معدل تثبيط أي 62.7 في المائة ، IL - 6 ، 58.3 في المائة ، على التوالي ، في تركيز 0.5 في المائة ، وهو أعلى من المتوسط الصناعي ( 41.2 في المائة ) .

تطبيق المشهد و قيمة الصناعة

في المختبر المضادة للالتهابات اختبار يستخدم أساسا في العضلات الحساسة إصلاح ، ومكافحة جدري الشمس إصلاح مستحضرات التجميل للتحقق من فعالية الشركات يمكن أن توفر الدعم التقني على النحو التالي :

الصيغة الأمثل : اختيار أفضل إضافة كمية من المكونات النشطة المضادة للالتهابات مثل اسيا تيكوسايد

إعلان الامتثال : تلبية متطلبات الكشف عن " مهدئا " فعالية في مستحضرات التجميل فعالية الإعلان معايير التقييم

المنافسة في السوق : تعزيز القدرة التنافسية للمنتجات من خلال طرف ثالث اختبار البيانات ، مثل العلامة التجارية الدولية من خلال اختبار المنتج قسط زيادة 20%

جنبا إلى جنب مع زيادة متطلبات السلامة للمستهلكين مستحضرات التجميل ، في المختبر المضادة للالتهابات الفحص أصبح البند الرئيسي من فعالية التقييم . مختبر يشير إلى أن الشركات يجب أن أعرض هذا الاختبار في مرحلة تطوير المنتجات ، جنبا إلى جنب مع حقوق التصحيح اختبار لتشكيل سلسلة كاملة من الأدلة ، ليس فقط لضمان الامتثال المنتج ، ولكن أيضا لتعزيز الثقة في السوق .