3T3 - L1 الماوس الجنينية الخلايا الليفية العلامة التجارية

معلومات السلع :

تجميد السائل : 55 ٪ قاعدة متوسطة + 40 ٪ FBS + 5 ٪ DMSO

درجة الحرارة : النيتروجين السائل

مخطط الثقافة ( الافتراضي )سمتوسطة النمو : dmem + 10 ٪ سي + 1 ٪ ع / ث

شروط التدريب :المرحلة الغازية : الهواء ، 95 ٪ ؛ CO2， 5 ٪ ، درجة الحرارة : 37 درجة مئوية

النسبة الموصى بها1 : 3-1 : 4

وصف الخلفية3T3 - L1 الخلايا هي سلالة المستمر 3T3 ( الفئران السويسرية ) التي تم الحصول عليها عن طريق الاستنساخ . عندما 3T3 - L1 انقسام الخلايا من الوجبات إلى كامل و تثبيط الاتصال ، 3T3 - L1 الخلايا عكس من الدهون مثل الدهون . في الثقافة المتوسطة ، وارتفاع محتوى المصل يمكن أن تعزز تراكم الدهون في الخلايا 3T3 - L1 .

العمر ( الجنس )جنين

أنواع الخلاياعفوية خلد الخلايا

مستوى السلامة البيولوجيةBSL - 1

التعبير عن مستقبلاتالأنسولين، المعبر عنه

الحفاظ على آليةATCC؛ CL-173 ATCC؛ CCL-92.1BCRC؛ 6015

النقل والتخزين :

الجليد الجاف النقل وإنعاش الخلايا الحية

( 1 ) 1 مل من الجليد الجاف التعبئة والتغليف والنقل ، بعد تلقي - 80 درجة الثلاجة بين عشية وضحاها بعد الحفظ في النيتروجين السائل أو الانتعاش المباشر ، إذا كان الثلج الجاف قد تم العثور على تطاير نظيفة ، غطاء زجاجة من الجليد ، تلف الخلايا الملوثة ، يرجى الاتصال بنا على الفور .

( 2 ) زجاجة T25 تعافى الخلايا الحية يتم شحنها في درجة حرارة الغرفة ، بعد تلقي العلاج وفقا الخلية المستقبلة .

بعد تلقي العلاج بالخلايا :

1 ) بعد تلقي الخلايا ، 75 ٪ من الكحول زجاجة تعقيم الجدار سوف توضع في زجاجة T25 37 ℃ حاضنة حوالي 2-3 ساعات ، إذا وجدت أن الثقافة زجاجة مكسورة ، تسرب السائل ، وتلوث الخلايا ، يرجى الاتصال بنا في الوقت المناسب بعد التقاط الصور .

2 ) يرجى التأكد من حالة الخلية تحت المجهر 4 أو 5 س ، وفي الوقت نفسه التقاط الصور من الخلايا التي تم تلقيها حديثا ( 10 × 20 × 2-3 ) على التوالي ، والحفاظ على صورة من ظهور ثقافة زجاجة ، كأساس للحصول على حالة الخلية بعد البيع .

3 ) خلية ملتصقة : الخلايا توضع في حاضنة الثقافة 37 ℃ لمدة 2-3 ساعات ، نمو الخلايا الملتصقة لوحظ تحت المجهر . إذا كانت كثافة نمو الخلايا أقل من 60 ٪ ، متوسطة الثقافة يمكن إزالتها ( إذا كانت الخلايا غير ملتصقة تحتاج إلى إعادة تدويرها بواسطة الطرد المركزي ، ثم علقت في الثقافة الأصلية زجاجة ) و 6-8 مل من الثقافة المتوسطة الجديدة تضاف إلى الثقافة خلية مربع . إذا كان نمو الخلايا كثافة تصل إلى 70 ٪ - 80 ٪ ، يمكن أن تحمل على مرور العلاج . إذا كانت الخلايا التي فقدت بسبب الاهتزاز النقل تحتاج إلى إعادة تدويرها بواسطة الطرد المركزي .

معالجة الخلايا

1 ) إنعاش الخلايا المجمدة :

تجميد أنبوب يحتوي على 1 مل من تعليق خلية كان مهزوز بسرعة وذاب في 37 ℃ حمام مائي ، ثم أضيفت إلى أنبوب الطرد المركزي تحتوي على 4-6 مل من الثقافة المتوسطة . في 1000 دورة في الدقيقة ، الطرد المركزي لمدة 3-5 دقائق ، supernatants كانت مهجورة و الخلايا المتوسطة كانت معلقة مرة أخرى . تعليق خلية ثم أضيفت إلى قارورة تحتوي على 6-8ml متوسطة الثقافة ( أو طبق ) لمدة ليلة في 37 ℃ . . . . . . . نمو الخلايا و كثافة الخلية لوحظ تحت المجهر في اليوم التالي .

2 ) مرور الخلية : إذا كانت كثافة الخلية تصل إلى 80 ٪ - 90 ٪ ، يمكن أن تحمل على مرور الثقافة .

يمكن الإشارة إلى الطرق التالية من أجل مرور الخلايا الملتصقة :

1 - إزالة طاف ، وغسل الخلايا مع برنامج تلفزيوني بدون أيونات الكالسيوم والمغنيسيوم 1-2 مرات .

2 - إضافة 0.25 في المائة ( ث / ت ) - 0.53 ملم EDTA في قارورة ( T25 1-2ml ، T75 2-3ml ) و يهضم في 37 ℃ لمدة 1-2 دقيقة ( عسر الهضم الخلايا يمكن أن تطيل فترة الهضم بشكل صحيح ) ، ثم لاحظ تحت المجهر ، إذا كان معظم الخلايا تصبح مستديرة و تقشر ، تأخذ مرة أخرى إلى طاولة العمليات بسرعة .

3 - ضخ بلطف ، الطرد المركزي في 1000 دورة في الدقيقة لمدة 3-5 دقائق ، تجاهل طاف ، إضافة 1-2 مل متوسطة الثقافة ثم تهب بالتساوي . تعليق خلية تم تقسيمها إلى 2 : 1 زجاجة T25 ، 6-8 مل من وسائل الإعلام الجديدة أضيفت إلى الحفاظ على نمو الخلايا .

cryopreserved الخلايا : بعد تلقي الخلايا ، فمن المستحسن أن cryopreserved دفعة من بذور الخلايا في أول 3 أجيال من الثقافة لاستخدامها في التجارب اللاحقة .

منتجات الشركة للبيع :