لاكتات ديهيدروجيناز في المصل النشاط ( wst-8 الأسلوب )

لاكتات ديهيدروجيناز في المصل )LDHمبدأ تحديد النشاط micromethod‌نعم من خلال الكشفLDHالحد من حمض البيروفيك في حمض اللاكتيكNADHغير مباشر تحديد كمية توليدLDHنشط .

عملية محددة على النحو التالي :

مبدأ رد الفعلفيLDHتحت تأثيرNAD+استعادة توليدNADHمنتدىNADHمع .WST - 8التفاعل لإنتاج اللون ، وبالتالي قياس الألوانأقصى = 450 نانومتر) ) .

رد فعل الشرطLDHويلNADاستعادةNADHوNADHمع .WST - 8التفاعل يولد اللون . هذا رد الفعل هو القيام به على الجليد لتجنب الضوء .اختبار العازلةواللاكتاتوNADوWST - 8ومحسنإزالة من الثلاجة قبل التجربة و التوازن في درجة حرارة الغرفة .

الامتصاصيةفي450 نانومترقياس الامتصاصية في الطول الموجيLDHالنشاط يتناسب طرديا ، ويمكن تحديد طريقة اللونيةLDHنشط .

الخطوات التجريبية والمعدات اللازمة

الخطوات التجريبيةسائل التحضير )1ساختبار العازلةوNADوWST - 8ومحسنو .اللاكتاتخليط متجانس96إضافة عينات إلى لوحة المسام أو تتبع الزجاج طبق اللونية .37الامتصاصية قيست بعد الحضانة في درجة حرارة ثابتة .

المعدات المطلوبةenzyme-labeller أو مرئية الإجار450 نانومتردرجة حرارة ثابتة مربع ، صانع الجليد ، وانخفاض درجة حرارة الطرد المركزي96فتحة لوحة أو تتبع الزجاج طبق اللونية ، قابل للتعديل ماصة بندقية بندقية الرأس ، ديونيزيد المياه ، خلاط ( إذا كان عينة الأنسجة ) .

الاحتياطات التجريبيةبشكل غير رسمي

حفظ الكاشفمكونات مثلاختبار العازلةواللاكتاتوNADوWST - 8ومحسنالحفاظ على الجليد من الضوء ، وتجنب تكرار التجميد والذوبان .

‌الاحتياطات التشغيليةالتجربة برمتها يجب أن تتم على الجليد لتجنب تأثير الضوء على النتائج .( أ )