scc7 ( الماوس سرطان الخلايا الحرشفية الخلية )

الخصائص الأساسية للخلايا

سرطان الخلايا الحرشفية ، SCC

خصائص النمو : نمو ملتصقة

مورفولوجيا الخلايا الظهارية

خلفية : scc7 الماوس خلية سرطان الخلايا الحرشفية ( SCC ) هو نوع من الخلايا التي تم الحصول عليها من أنسجة الجسم أو الجهاز ، كولاجيناز ، وغيرها من الأساليب ، ومثقف في المختبر لمحاكاة البيئة في الجسم الحي .

مستوى السلامة البيولوجية : 1

مواصفات الخلية : 1 × 106cells / T25 قارورة أو 1ml تجميد أنبوب التعبئة والتغليف

متوسطة : 1640 + 10 ٪ سلاح

الثقافة شرط : بخار المرحلة : الهواء ، 95 ٪ ؛ ثاني أكسيد الكربون درجة الحرارة : 37 درجة مئوية ، حاضنة الرطوبة 70 ٪ - 80 ٪ .

حالة التخزين : 90 ٪ FBS ، DMSO 10 ٪ ،

مضاعفة الوقت : 2-3 مرات في الأسبوع

نسبة المقطع : 1 : 2

السائل تغيير التردد : 2-3 أيام تغيير السائل مرة واحدة

عملية زراعة الخلايا

1 ) إحياء الخلايا : الخلايا التالية هي ثقافة بالتبريد فقط للرجوع اليها ، خطوات عملية محددة هي أساسا مع تعليمات المنتج

تجميد الأنابيب التي تحتوي على 1 مل من تعليق خلية هزت وذوبان بسرعة في حمام مائي في 37 ℃ و 4 مل متوسطة الثقافة كانت مختلطة بالتساوي . بعد الطرد المركزي لمدة 3 دقائق في 1000 دورة في الدقيقة ، supernatants تم التخلص منها ، و 1-2 مل متوسطة الثقافة أضيفت ، ثم تهب بالتساوي . ثم كل تعليق خلية أضيفت إلى زجاجة تحتوي على كمية مناسبة من متوسطة الثقافة بين عشية وضحاها ( أو تعليق خلية أضيفت إلى طبق بتري 6 سم ، إضافة حوالي 4 مل متوسطة الثقافة بين عشية وضحاها ) . تغيير السوائل في اليوم الثالث و فحص كثافة الخلية .

2 ) مرور الخلية : إذا كانت كثافة الخلية تصل إلى 80 ٪ - 90 ٪ ، يمكن أن تحمل على مرور الثقافة .

a、 عندما تنمو الخلايا إلى 80 ٪ من المساحة التي تغطيها الثقافة زجاجة ، السائل في الثقافة 25cm2 زجاجة هو التخلي عن برنامج تلفزيوني يستخدم لغسل الخلايا مرة واحدة .

b、 إضافة حوالي 1 مل من 0.25 في المائة من الجهاز الهضمي إلى الثقافة زجاجة ، لاحظ تحت المجهر المقلوب ، إضافة إلى الثقافة المتوسطة لوقف الهضم بعد الخلية يتقلص ويصبح مستدير ، ثم ضربة بلطف الخلايا قبالة ، ثم نقل إلى تعليق 15ml أنبوب الطرد المركزي ، الطرد المركزي 1000rpm لمدة 5 دقائق .

c、 إن supernatants كانت مهجورة ، عجل الخلايا كانت معلقة في 12 مل متوسطة ، ثم subcultured في قارورة في نسبة 1 : 2 ، وأخيرا مثقف في 37 ℃ و 5 ٪ من ثاني أكسيد الكربون خلية ثقافة الدائرة .

d、 بعد أن تمسك الخلايا ، ومراقبة نتائج الثقافة ، ثم تغيير الثقافة أو مرور .

3 ) الحفاظ على الخلايا : عندما تكون الخلايا في حالة جيدة من النمو ، يمكن الحفاظ على الخلايا بالتبريد . أدناه زجاجة T25 على سبيل المثال؛

a、 عندما تنمو الخلايا إلى 80 ٪ من المساحة التي تغطيها الثقافة زجاجة ، السائل في الثقافة 25cm2 زجاجة هو التخلي عن برنامج تلفزيوني يستخدم لغسل الخلايا مرة واحدة .

b、 إضافة 0.25 ٪ عصير هضم حوالي 1 مل في الثقافة زجاجة ، لاحظ تحت المجهر المقلوب ، بعد تراجع الخلايا تتحول الجولة ، إضافة إلى الثقافة المتوسطة لإنهاء عملية الهضم ، ضربة بلطف الخلايا بحيث تسقط ، ثم نقل إلى تعليق 15 مل أنبوب الطرد المركزي ، الطرد المركزي 1000 دورة في الدقيقة لمدة 5 دقائق .

c、 تعليق الخلايا مع كمية مناسبة من السائل ( FBS : DMSO = 9 : 1 ) ووضعها في أنبوب المجمدة .

d、 أولا ، الحفاظ على الخلايا المجمدة في - 20 ℃ 1.5h ، ثم نقلها إلى - 80 ℃ بين عشية وضحاها ، 24 ساعة في وقت لاحق في النيتروجين السائل التخزين على المدى الطويل . استخدام برنامج التبريد مربع يمكن وضعها مباشرة في - 80 ℃ . . . . . . .

ثالثاً - المسائل التي تحتاج إلى اهتمام في مجال التدريب

1 . بعد تلقي الخلايا ، أولا مراقبة ما إذا كانت الخلية زجاجة سليمة ، إذا كان هناك تسرب السائل ، التعكر ، وما إلى ذلك ، إذا كانت هذه الظاهرة تحدث ، يرجى الاتصال بنا في الوقت المناسب .

2 - قراءة تعليمات الخلية بعناية ، فهم المعلومات ذات الصلة من الخلايا ، مثل شكل الخلية ، متوسطة الثقافة ، نسبة المصل ، السيتوكينات ، وما إلى ذلك ، لضمان أن ظروف ثقافة الخلية هي نفسها ، إذا كانت ظروف ثقافة مختلفة ، مما أدى إلى مشاكل في الخلايا ، المسؤولية تقع على عاتق العملاء .

3 - مسح سطح الخلية زجاجة مع 75 ٪ من الكحول . بسبب مشاكل النقل ، بعض الخلايا هي ظاهرة طبيعية بسبب التغيرات في درجة الحرارة و تحطيم . بعد مراقبة حالة جيدة من الخلايا ، T25 زجاجة وضعت في 37 ℃ حاضنة لمدة 2-4 ساعات مع 75 ٪ الكحول تعقيم زجاجة الجدار .

4 - خلية ملتصقة يمكن هضمها ، تعليق خلية يمكن أن تكون مختلطة بشكل موحد لجمع الخلايا ، 900 دورة في الدقيقة - 1000 دورة في الدقيقة الطرد المركزي لمدة 3 دقائق ، و طاف يمكن التخلص منها . إضافة 5 مل من برنامج تلفزيوني تعليق الخلايا ، ثم 900 دورة في الدقيقة - 1000 دورة في الدقيقة الطرد المركزي لمدة 3 دقائق ، وذلك باستخدام وسائل الإعلام الجديدة تعليق الخلايا ، ثم تلقيح في زجاجة جديدة أو طبق بتري ، وضعت في الثقافة مربع .

5 - يطلب من العميل استخدام نفس الشرط متوسطة الثقافة خلية ثقافة .

6 - نوصي العملاء الحصول على الخلايا قبل 3 أيام من أخذ عدة صور من الخلايا ، وتسجيل حالة الخلية ، لتسهيل التواصل مع القسم التقني . بسبب النقل ، كل خلية حساسة قد تكون غير مستقرة ، يرجى الاتصال بنا في الوقت المناسب لإعلام الخلية الظروف المحددة ، حتى أن الفنيين لدينا متابعة الزيارة حتى يتم حل المشكلة .

7 . هذه الخلية هي لأغراض البحث العلمي فقط .

8 - ملاحظة : وسائل الإعلام وسائل الإعلام المستخدمة في النقل ( الري ) لا يمكن استخدامها في زراعة الخلايا ، يرجى استبدال وسائل الإعلام الجديدة التي أعدت وفقا لشروط تعليمات زراعة الخلايا . اقتراح 1 : 2 في أول مرور بعد تلقي الخلايا .

9 - ملاحظة : 1 : 2 هو مرور زجاجة T25 T25 زجاجة أو 2 6 سم طبق . ليس 1 زجاجة T25 يمر 2 10cm أطباق .

منتجات الشركة للبيع :