اسم الخلية WT 9-7 حقوق جسمية مرض الكلى المتعدد الكيسات الخلايا الظهارية $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ ر ر 9-7 الخلايا الظهارية وزن البضائع رقم xy-h1032 ص ن نوع جنس الإنسان $ $ $ $ $ $ $ $ $ ر ر ن ن ن الأنسجة المستمدة من الكلى خصائص نمو الخلايا الظهارية الجدار $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ ر ر 1 أمبير أمبير ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر ر التابير . 10 ^ 6cells / T25 قارورة الثقافة أو 1ml تجميد أنبوب التعبئة والتغليف
wt9-7 الخلايا الظهارية الإنسان جسمية مرض الكلى المتعدد الكيسات
الخصائص الأساسية للخلايا |
اسم الخلية |
wt9-7 الخلايا الظهارية الإنسان جسمية مرض الكلى المتعدد الكيسات |
خلية الاسم المستعار |
WT 9-7 |
رقم السلعة |
XY-H1032 |
أصل الأنواع |
إنسان |
العمر والجنس |
المؤنث |
المصدر التنظيمي |
كلوي |
خصائص النمو |
نمو ملتصقة |
شكل الخلية |
الخلايا الظهارية مثل |
معلومات أساسية |
- |
مستوى السلامة البيولوجية |
- |
مواصفات الخلية |
1 × 10 ^ 6cells / T25 قارورة أو 1ml تجميد أنبوب التعبئة والتغليف |
الكشف عن الميكوبلازما |
لا شيء |
الثقافة المتوسطة |
DMEM + 10٪ مصل البقر الجنين (FBS) |
حالة ثقافة |
المرحلة الغازية95%الهواء .5%ثاني أكسيد الكربون؛ درجة الحرارة37℃ |
حالة التجميد |
المصل خالية من السوائل المجمدة ، النيتروجين السائل التخزين |
مضاعفة الوقت |
24-30ساعة |
بعد تلقي الخلاياالتعامل مع
( 1 )بعد الحصول على الخلايا ، 75 ٪ من الكحول زجاجة تعقيم الجدار T25 زجاجة توضع في درجة حرارة الغرفة حوالي 1 ساعة ، إذا وجدت أن الثقافة زجاجة مكسورة ، تسرب السائل ، وتلوث الخلايا ، يرجى الاتصال بنا في الوقت المناسب بعد التقاط الصور .
( 2 )يرجى التأكد من حالة الخلية تحت 4 أو 5 × المجهر ، و 2-3 صور من الخلايا التي تم تلقيها حديثا ( 10 × 20 × على التوالي ) و صورة واحدة من ظهور ثقافة زجاجة يتم الاحتفاظ بها ، والتي يمكن أن تكون بمثابة أساس حالة الخلية عند تلقيها بعد البيع .
( 3 )خلايا ملتصقةالخلايا في درجة حرارة الغرفة لمدة 1 ساعة ، نمو الخلايا و الالتصاق لوحظ تحت المجهر ، وبعض الخلايا الملتصقة سوف تسقط من الاهتزاز في عملية النقل السريع و تصبح مستعمرة .إذا كانت كثافة نمو الخلايا أقل من 60 ٪ ، متوسطة الثقافة يمكن إزالتها ( إذا كانت الخلايا غير ملتصقة تحتاج إلى إعادة تدويرها بواسطة الطرد المركزي ، ثم علقت في الثقافة الأصلية زجاجة ) ، ثم حبوب منع الحمل الجديدة متوسطة الثقافة 6-8ml أضيفت إلى الثقافة خلية مربع . إذا كان نمو الخلايا كثافة تصل إلى 70 ٪ - 80 ٪ ، يمكن أن تحمل على مرور العلاج . إذا كانت الخلايا التي فقدت بسبب الاهتزاز النقل تحتاج إلى إعادة تدويرها بواسطة الطرد المركزي .
( 4 )طريقة عملية تقشير الخلايا أثناء النقل : الطرد المركزي جمع الخلايا المتساقطة ثم التخلص من طاف ، وغسلها مرة أخرى مع برنامج تلفزيوني ، الطرد المركزي التخلص من طاف ، إضافة 1 مل من الانزيم في أنبوب الطرد المركزي لتفريق وهضم حوالي 20 ثانية ، مضيفابعد هضم حبوب منع الحمل في جميع أنحاء وسائل الإعلام ، الطرد المركزي إعادة تمهيد ، وترك الخلايا الملتصقة تعمل وفق طريقة طبيعية ملتصقة الخلايا .
( 5 )ملاحظة : وسائل الإعلام المستخدمة في النقل لا يمكن استخدامها في زراعة الخلايا ، يرجى استبدال وسائل الإعلام الجديدة التي تم إعدادها وفقا لتعليمات خلية ثقافة الشرط .حبوب منع الحمل في جميع وسائل الإعلام الثقافة الخلية . بعد الحصول على الخلايا ، أول مرور اقترح T25 قارورة الثقافة 1 : 2 مرور .
ثالثاغرامةعملية زراعة الخلايا
( 1 ) خلايا الإنعاشبعد تجميد خلية ثقافة العلاج فقط لأنّ مرجع .
سوف تحتوي على1 ملتجميد أنبوب تعليق خلية في 37يهز بسرعة في حمام مائي4 ملمتوسطة مختلطة بالتساوي . في1000 دورة في الدقيقةالطرد المركزي في حالة3 دقايق، التخلص من طاف ، إضافة1-2 ملمتوسطة الثقافة ثم تهب بالتساوي . ثم كل تعليق خلية تضاف إلى زجاجة تحتوي على كمية مناسبة من متوسطة الثقافة بين عشية وضحاها ( أو تعليق خلية تضاف إلى متوسطة الثقافة بين عشية وضحاها ) .6 سمإضافة حوالي4 ملحبوب منع الحمل متوسطة الثقافة الكاملة ، ومثقف بين عشية وضحاها ) . تغيير السوائل في اليوم الثالث و فحص كثافة الخلية .
2 ) مرور الخلية :إذا كانت كثافة الخلية تصل إلى 80 ٪ - 90 ٪ ، يمكن أن تحمل على ثقافة فرعية .
)أ(من دون الكالسيوم والمغنيسيوم الأيونات .PBSترطيب الخلايا1-2مرة .
)ب(زائد1 ملعصارة هضمية )0.25٪ تريبسين-0.02٪ EDTAفي الثقافة زجاجة ، السائل الهضمي تتسرب إلى جميع الخلايا .37الهضم في حاضنة1-3 دقيقةإذا كان الجزء الأكبر من الخلايا تصبح مستديرة و تسقط ، ثم العودة إلى طاولة العمليات بسرعة ، اضغط على عدة زجاجات الثقافة ، ثم إضافة2-3 ملحبوب منع الحمل في جميع وسائل الإعلام إنهاء الهضم .
)ج(خفقت برفق ووضعها في أنبوب الطرد المركزي العقيم .1000 دورة في الدقيقةطرد مركزي5 دقايق، التخلص من طاف ، إضافة1-2 ملالثقافة المتوسطة ثم تهب بالتساوي .
(د)تعليق خلية1 : 2نسبة إلى محتوى جديد8 ملفي صحن جديد أو زجاجة متوسطة الثقافة ، الثقافة في حاضنة .
ملاحظة مرور الخلايا الملتصقة :
ليجب أنPBSيغسل مرة أخرى .
لمراقبة الخلايا عدة مرات لإتقان الوقت ، لا تتوقف عن الهضم دون أن تفقد الخلايا الأساسية ، ثم ضربة أسفل ، بحيث أكثر عرضة للتمايز والموت .
للا تهب على الخلايا في كل وقت .
( 3 ) تجميد الخلاياعندما تنمو الخلايا في حالة جيدة ، يمكن الحفاظ على الخلايا بالتبريد . أدناهتي25 زجاجة على سبيل المثال ;
)أ(جمع الخلايا و الثقافات الخلية ، ووضعها في أنابيب الطرد المركزي العقيم .1000 دورة في الدقيقةالطرد المركزي في حالة4 دقيقة، التخلص من طاف ، معPBSتنظيف مرة واحدةPBS، عد الخلايا .
)ب(وفقا لعدد من الخلايا ، إضافة المصل خالية من الخلايا بالتبريدسس1 × 10س/ مل، وتخلط بلطف ، وتجميد كل أنبوب التخزين المجمد1 ملتعليق خلية ، وإيلاء الاهتمام إلى الحفاظ على تجميد أنبوب لجعل علامات .
)ج(وضع أنبوب التخزين المجمد-80ثلاجات24 ساعةثم يتم نقلها إلى النيتروجين السائل الري والتخزين . سجل موقع التخزين البارد في المرة القادمة .
رابعازراعة نقاط الاهتمام
( 1 )الخلايا التي تعاني من مشاكل في الإرسال
)أ(جميع أنواع المشاكل التي واجهتها في نقل الخلايا ، مثل فقدان الخلايا ، زجاجة الجسم التالفة ، تسرب السائل من الثقافة المتوسطة .
)ب(مشكلة التلوث الخلوي ، يرجى تقديم نتائج الاختبار الحقيقي لنا في غضون 3 أيام بعد استلام المنتج ، والتحقق من ذلك وإرسالها مرة أخرى .
)ج(معظم الخلايا لا البقاء على قيد الحياة بعد 2 ساعة من التخزين البارد في درجة حرارة الغرفة و 2 أيام بعد الانتعاش .
(د)بعد 2 أيام من الانتعاش ، أو الخلايا التي يتم شحنها في درجة حرارة الغرفة كانت لا تزال في 2 ساعة و لم تفتح ، مما تسبب في تلوث و إعادة الإرسال .
(هـ)إذا كان لديك أي معلومات أخرى عن هذا الموضوع الرجاء إضافته مجانا .
(و)يرجى التقاط الصور في اليوم 2 و 3 أيام بعد استلام الخلايا . إذا كنت لا أقول لهم في 3 أيام ، وسوف يعتبر المنتج المؤهلين . إذا كان هناك أي مشكلة في غضون 4-7 أيام ، يرجى تقديم صور من 3 أيام قبل استلام الخلايا ، صور من مشاكل في الخلايا ، فضلا عن تفاصيل الخطوات العملية ذات الصلة من الخلايا .
2وفي حالة وجود مشاكل في الخلايا التي لا تتكرر
)أ(عملية العميل يسبب التلوث الخلوي ، لا إعادة الإرسال ؛
)ب(العميل عملية خطيرة خطأ يسبب حالة الخلية ليست جيدة ، لا ترسل مرة أخرى .
)ج(نحن لا نوصي نظام زراعة الخلايا التي تسبب سوء حالة الخلية ، لا إعادة الإرسال .
(د)حالة الخلية ليست جيدة ، لا توفر صورة واضحة عن حالة الخلية قبل 3 أيام من الثقافة ، لا إعادة الإرسال .
(هـ)الخلايا المستزرعة من قبل العلاجات الأخرى التي تسبب مشاكل في الخلايا ، لا إعادة الإرسال .
(و)تلقي الخلايا و العثور على مشاكل مع موظفي خدمة العملاء في وقت الاتصال أكثر من 7 أيام ، لا إعادة الإرسال ؛
(ز)حسب الحالة
خامساً - نقاط الاهتمام
1. جميع الخلايا الحيوانية تعتبر يحتمل أن تكون خطرة بيولوجيا ، ويجب أن تعمل في المرحلة الثانية من السلامة البيولوجية ، يرجى ملاحظة أن جميع النفايات السائلة والأواني التي تأتي في اتصال مع هذه الخلايا يجب أن تكون معقمة قبل التخلص منها .
2. من المستحسن دائما استخدام القفازات الواقية ، والملابس الواقية والأقنعة الواقية عند استعادة الخلايا المجمدة . ملاحظة : تجميد الأنابيب المغمورة في النيتروجين السائل سوف تتسرب ، وسوف ببطء ملء النيتروجين السائل . عندما يذوب النيتروجين السائل في مرحلة الغاز يمكن أن يؤدي إلى انفجار السفينة أو ضربة قبالة غطاء مع قوة خطيرة ، مما أدى إلى ارتفاع الحطام ، مما تسبب في أضرار بشرية .
3. هذه الخلية هو البحث العلمي فقط ! تعليمات للرجوع اليها فقط مع وصول الفعلية تعليمات تسود !