الخلايا الدبقية الصغيرة البشرية

جميع منتجات الشركة هي التجارب العلمية فقط ، لا تفعل التجارب العلمية الأخرى خارج استخدام !

حقوق microglia معزولة من أنسجة المخ . الدماغ ينقسم إلى نصفين ، القشرة المخية( المادة الرمادية ) تغطي معظم نصف الكرة المخية ، حيث تتركز الخلايا العصبية . الداخلية هي المادة البيضاء تتكون من الألياف العصبية أو المايلين . كل نصف له ثلاثة جوانب : الجانب الخارجي ( حوالي 1 / 3 من القشرة ) ، الجانب الداخلي و السفلي ( 2 / 3 من القشرة ) ؛ هناك العديد من الأخاديد أو الشقوق على سطح نصف الكرة الأرضية ، والتي هي عميقة أو ضحلة . المهم التلم و الشق على الجانب الخارجي من الدماغ تشمل الشق الجانبي من الدماغ ، الشق القذالي الجداري ووسط التلم . القشرة المخية يمكن تقسيمها إلى أربعة أجزاء : الفص الجبهي ، الفص الجداري ، الفص الصدغي و الفص القذالي . الخلايا الدبقية الصغيرة هي نوع من الخلايا الدبقية ، أي ما يعادل الضامة في الدماغ والحبل الشوكي . الخلايا الدبقية الصغيرة تمثل حوالي 20 ٪ من الخلايا الدبقية في الدماغ ، والحفاظ على مسح تلف الأعصاب ، لويحات ، والمواد المعدية في الجهاز العصبي المركزي . العديد من الدراسات السريرية والنفسية تشير إلى أن تنشيط الخلايا الدبقية الصغيرة تلعب دورا هاما في التسبب في الأمراض العصبية ، مثل مرض باركنسون ، والتصلب المتعدد ومرض الزهايمر . ولكن الكثير من تنشيط أو فقدان السيطرة على الخلايا الدبقية الصغيرة يمكن أن يسبب العصبية . وهي مصادر هامة proinflammatory العوامل الاكسدة ، مثل عامل نخر الورم ( TNF ) ، وأكسيد النيتروز ، انترلوكين ، وغيرها من المواد العصبية . الوظيفة الرئيسية neuroglial الخلايا : ① neuroglial يظهر في مرحلة مبكرة من تطور الدماغ إلى مرحلة النضج في عملية التحول . ② عند موت الخلايا المبرمج ، أو في عملية التنمية في الدماغ ، الجهاز العصبي المركزي التالفة أو التالفة مرضيا ، الدبقية يمكن أن يكون الدماغ الضامة . الخلايا الدبقية يمكن التعبير عن مستضد في سي دي - 4 إيجابية الخلايا التائية في النوع الثاني من معقد التوافق النسيجي الكبير ، يمكن أن تشارك مستضد مع الخلايا المكونة للدم و الضامة .
طريقة العرض :

حقوق microglia المعزولة من المختبر تم إعدادها من خلال الجمع بين انزيم الهضم و تفاضلي التصاق الأسلوب .5 × 10 ؟ خلايا / زجاجات .
اختبار الجودة :

مختبر الإنسان microgliaنقاء cd11b المناعية يمكن أن تصل إلى أكثر من 90 ٪ ، لا تحتوي على فيروس نقص المناعة البشرية - 1 ، الالتهاب الكبدي الوبائي ، سي ، الميكوبلازما ، البكتيريا والخميرة والفطريات .

الثقافة المتوسطة احتواءFBS、 إضافات النمو ، penicillin streptomycin , الخ .

تغيير التردد كلتغيير السوائل مرة واحدة في 2-3 أيام

خصائص النمو عصا الجدار

شكل الخلية مغزلي ، مضلع

خصائص مرور تنتمي إلى محطة تمايز الخلايا . مجموعة الخلايا غير التكاثري

السائل الهضمي ليدو كاين )12 مم)

حالة ثقافة مرحلة الغاز : الهواء ،95%； ثاني أكسيد الكربون، 5 في المائة

الأعمال التحضيرية

1 - إعداد المعدات التجريبية : إعداد أطباق بتري معقمة ، وزجاجات ، ماصات ، أنابيب الطرد المركزي ، والأدوات الجراحية ، وما إلى ذلك ، وإجراء التعقيم أو التعقيم المناسبة الأخرى .

2 - إعداد الكواشف : إعداد أو شراء مناسبة متوسطة الثقافة ، انزيم الهضم ( على سبيل المثال ، كولاجيناز ، وما إلى ذلك ) ، مصل بقري جنيني ، ومضادات الأكسدة وغيرها من الكواشف لضمان أن تكون عقيمة وفعالة .

3 - إعداد الحيوانات المختبرية أو الأنسجة المصدر : اختيار الحيوانات المناسبة وفقا لمتطلبات التجربة ، وإجراء المقابلة التخدير أو الإعدام ، والحصول على الأنسجة المطلوبة . أو الحصول على المنظمة من عينة الأنسجة الموجودة في المكتبة .

أخذ العينات والعلاج

1 . استخراج المواد : تحت ظروف معقمة ، وإزالة الأنسجة المستهدفة بسرعة ، والحد من الضرر على الأنسجة ، وإزالة الدهون الزائدة ، والأنسجة الضامة وغيرها من الأنسجة غير المستهدفة .

2 . تنظيف : إزالة الأنسجة مع ما قبل التبريد العقيم برنامج تلفزيوني شطف عدة مرات لإزالة الدم والشوائب .

3 - القص : قطع الأنسجة إلى قطع صغيرة من حوالي 1-2 ملم مكعب ، من أجل الهضم اللاحقة .

عزل الخلايا

1 - الهضم : قطع قطعة من الأنسجة في أنبوب الطرد المركزي يحتوي على كمية مناسبة من انزيم الهضم الهضم في 37 ℃ يهزّ طاولة أو حاضنة لبعض الوقت . أثناء عملية الهضم ، أنبوب الطرد المركزي يمكن أن يهز بلطف ، مما يجعل الجهاز الهضمي أكثر موحدة .

2 - إنهاء عملية الهضم : عندما يتم هضم معظم الأنسجة في تعليق خلية واحدة أو مجموعة صغيرة من الخلايا ، إضافة المصل تحتوي على وسائل الإعلام لإنهاء عملية الهضم .

3 - الترشيح و الطرد المركزي : استخدام خلية غربال لتصفية تعليق خلية ، وإزالة الأنسجة غير المهضوم شظايا ، ثم تصفية الطرد المركزي في سرعة مناسبة ، وجمع الخلايا هطول .

خلية المراقبة والكشف

1 . المراقبة اليومية : استخدام المجهر المقلوب لمراقبة مورفولوجيا الخلايا ، والنمو ، الكثافة ، وما إلى ذلك ، تسجيل التغيرات في الخلايا ، مثل العثور على الخلايا الملوثة أو غير طبيعي ، في الوقت المناسب لاتخاذ التدابير المناسبة .
2 - عدد الخلايا و الكشف عن النشاط : عند الضرورة ، التريبان الأزرق تلطيخ يمكن استخدامها للكشف عن عدد الخلايا و النشاط من أجل فهم نمو الخلايا و الحالة الصحية .

استخراج وفصل

1 . عملية سريعة

- يجب معالجة الأنسجة مباشرة بعد أخذ العينات ، وتجنب التعرض لفترات طويلة إلى درجة حرارة الغرفة أو البيئة غير الغذائية .

- شطف الأنسجة باستخدام برنامج تلفزيوني معقم أو محلول فسيولوجي لإزالة الدم والشوائب .

2 - اختيار الإنزيمات الهاضمة

- اختيار الإنزيمات الهاضمة وفقا لنوع الأنسجة ، وتجنب الإفراط في الهضم مما يؤدي إلى تلف الخلايا .

- وقت الهضم يجب أن تسيطر عليها بدقة ( عادة 10-30 دقيقة ) ، ويمكن ملاحظة حالة تفكك الخلية بواسطة المجهر .

تحسين ظروف الزراعة

1 - اختيار وسائل الإعلام

- استخدام وسائل الإعلام التي تحتوي على المصل أو بعض عوامل النمو ( على سبيل المثال dmem rpmi 1640 , الخ ) ، بعض الخلايا تحتاج إلى إضافة الأنسولين ، لو ، الخ .

- تجنب تغيير العلامات التجارية أو دفعات من وسائل الإعلام في كثير من الأحيان ، والحد من الإجهاد التكيف الخلوي .

2 . عصا الجدار و مرور

- ضعف قدرة الخلايا الأولية على الالتصاق بالجدران ، وقد تتطلب طلاء أطباق بتري ( مثل الكولاجين ، polylysine ) .

- كثافة مرور الوقت اقترح أن تسيطر على 70 ٪ - 80 ٪ ، والإفراط في التقارب يمكن أن يؤدي إلى تثبيط الاتصال والتمايز .

ثالثاً - مكافحة التلوث

1 . عملية معقمة

- العملية برمتها في مكتب سوبر نظيفة ، واستخدام المواد الاستهلاكية القابل للتصرف ، وتجنب التلوث الصليب .

- يمكن إضافة مقاومة مزدوجة في المتوسط ، ولكن استخدام على المدى الطويل قد تؤثر على نشاط الخلايا .

الكشف عن الميكوبلازما

- الكشف المنتظم عن تلوث الميكوبلازما ( على سبيل المثال ، بكر ) بعد التلوث ، يجب التخلص من الخلايا في الوقت المناسب .

رصد حالة

1 - المراقبة اليومية

- فحص شكل الخلية وكثافتها ولون المتوسط يوميا ، واستبدال المتوسط في الوقت المناسب ( عادة كل 2-3 أيام ) .

- قد تشير الأشكال الشاذة ( مثل الخلايا المستديرة أو الشظايا المتزايدة ) إلى التلوث أو نقص التغذية .

2 - مرور وتجميد

- عدد محدود من انقسام الخلايا الأولية ( عادة 5-10 أجيال ) التي تحتاج إلى وقت مبكر بالتبريد .

- يقترح استخدام DMSO + مصل ( أو متوسطة خاصة للتخزين بالتبريد ) للتخزين بالتبريد مع النيتروجين السائل بعد التدرج في درجة الحرارة .