-
البريد الإلكتروني
goy_shanghai@163.com
-
الهاتف
18321818584,15026555973
-
العنوان
chengliu الطريق ، منطقة جيادينغ ، شنغهاي
شنغهاي guyan الصناعة المحدودة
goy_shanghai@163.com
18321818584,15026555973
chengliu الطريق ، منطقة جيادينغ ، شنغهاي
[ اسم المنتج ]مضان الكمية الماوس فيروس التهاب الكبد التحقيق RT - PCR كيت
الاسمسفيروس التهاب الكبد (MHV) ProbegRT-PCRKit
[ مواصفات التغليف ]50 مرة / مربع
【الاستخدام المتوقعالماوس فيروس التهاب الكبدفيروس التهاب الكبد ( MHV ) هو نوع من فيروس الحمض النووي الريبي ، الفيروس موجود في الدم والأحشاء ، ولا سيما في الكبد والكلى ، ولكن أيضا في البراز والبول ، شديدة العدوى في الفئران الصغار ، التهاب الكبد في الفئران هو مرض معد بسبب MHV ، وزعت في الفئران المصابة ، ولكن في ظل الظروف العادية ، ومعظمهم من غير مهيمن العدوى ، إلا في ظل عوامل الإجهاد يمكن أن تصبح قاتلة من الأمراض ، وذلك أساسا التهاب الكبد والتهاب الدماغ ، لذلك من المهم تحديد الماوس فيروس التهاب الكبد السريع والحجر الصحي والوقاية من الأمراض . هذا المنتج هو أساس مسبار الفلورسنت RT-PCR الكمي التكنولوجيا وضعت خصيصا للكشف عن فيروس التهاب الكبد في الفئران عدة ، فقد الخصائص التالية :
1 - على استعداد لاستخدام ، يحتاج المستخدم فقط إلى تقديم نموذج الحمض النووي الريبي .
2 . التمهيدي والتحقيق الأمثل ، حساسية عالية .
3 . توفير مراقبة إيجابية ، من السهل التمييز بين عينات سلبية كاذبة .
4 - خصوصية عالية ، التمهيدي مصممة على أساس درجة عالية من المحافظة على المنطقة من الماوس فيروس التهاب الكبد ، لا تتفاعل مع الحمض النووي الريبي من الفيروسات الأخرى .
5 . هذا المنتج هو ما يكفي من 50 مرة من 20 μ ل نظام مسبار الفلورسنت RT-PCR الكمي فعل .
6 . هذا المنتج يمكن أن تستخدم فقط في البحث العلمي .
[ المواصفات والمكونات ]
تكوين |
تغليف |
طريقة التحقيقqrt-pcr العازلة |
500 ميكرولتر |
طريقة التحقيقqrt-pcr انزيم مختلطة |
100 ميكرولتر |
فلوريبكر قالب خاص مخفف |
1 مل |
الماوس فيروس التهاب الكبد يدقق في طريقةqrt-pcr التمهيدي يدقق في الحل المختلط |
150 ميكرولتر |
صغير فأر كبد . التهاب مرض . سمم استكشافية إبر القانونqrt-pcr إيجابية السيطرة ( 1 × 10 نسخة / ميكرولتر ) |
50 ميكرولتر |
دليل المستخدم |
1نسخ |
【النقل والتخزينوالنقل المبردة ،- 20 ℃ لمدة 12 شهرا .
【كاشف الذاتيوعينة رلا.
الماوس فيروس التهاب الكبد مسبار الفلورسنت RT-PCR الكمي كيت[ طريقة الاستخدام ]تمييع منحنى القياسية عينة ( على سبيل المثال ، 10e2-10e6 نسخة / μ ل ) بسبب تركيز عال جدا من المنتجات القياسية ، بعد تخفيف العمليات يجب أن تتم في مناطق منفصلة ، لا تلوث العينات أو المكونات الأخرى في هذه المجموعة . من أجل زيادة استقرار المنتج وتجنب انتشار مسببات الأمراض المعدية ، هذا المنتج لا يوفر عينة حية إيجابية السيطرة ، فقط يوفر غير المعدية الحمض النووي شظايا إيجابية السيطرة .
1 . مارك 6 أنابيب الطرد المركزي ، 6 ، 5 ، 4 ، 3 ، 2 ، 1 ، على التوالي .
2 - إضافة 45 μ ل fluorescence-pcr قالب خاص مخفف مع بندقية رئيس الأساسية ، على التوالي .
3 - إضافة 5 μ L1 × 10e7 نسخة / μ ل إيجابية السيطرة ( المقدمة من عدة ) في أنبوب 6 ، 1 × 10e6 نسخة / μ ل منحنى القياسية العينات التي تم الحصول عليها . ضعي الثلج جانبا .
4 - تغيير بندقية الرأس ، إضافة 5 μ L1 × 10 E6 نسخة / μ ل السيطرة الإيجابية ( الحصول على مزيد من تمييع ) في أنبوب 5 ، تهتز تماما لمدة 1 دقيقة ، والحصول على 1 × 10 E5 نسخة / μ ل منحنى القياسية عينة . ضعي الثلج جانبا .
5 - تغيير رئيس بندقية ، إضافة 5 μ L1 × 10 نسخة / μ ل في أنبوب 4 ، والحصول على 1 × 10 نسخة / μ ل منحنى القياسية . ضعي الثلج جانبا .
6 - كرر العملية المذكورة أعلاه حتى يتم الحصول على ستة منحنيات القياسية المخفف . استخدام الجليد .
عينة الرناإعداد
7 . إذا كان هناك ن عينات ، ويفضل أن يكون ذلك مع ن + 2 استخراج ، أكثر من واحد هو جهاز كمبيوتر ( عينة إعداد مراقبة إيجابية ) ، والآخر هو نورث كارولاينا ( عينة إعداد مراقبة سلبية ) . مجموع حجم يمكن أن يكون نفس الحجم المطلوب في كل إعداد مع 10 μ ل إيجابية السيطرة على 10 ، 000 مرة مخفف بالإضافة إلى كمية معينة من الماء . وبالإضافة إلى ذلك ، يتم استخدام المياه NC .
8 . هذه المجموعة هي متوافقة مع معظم أدوات استخراج الحمض النووي الريبي الفيروسية في السوق .منتدى
ثلاثةprobeqrt-pcr فعل(ل النظام في إعداد نموذج الدائرة .و
9 . إذا كان التحليل الكمي و تكرارها مرة واحدة فقط ، ثم ن + 9 أنابيب الاسترداد وصفت ، بما في ذلك ن + 2 ن + 2 عينات من الخطوة السابقة ، واحدة سلبية PCR السيطرة ( استخدام المياه كقالب ) ، و 6 منحنيات القياسية . إذا كان التحليل النوعي و تكرار مرة واحدة فقط ، ثم ن + 4 أنابيب الاسترداد وصفت ، بما في ذلك ن + 2 ن + 2 عينات من الخطوة السابقة ، واحدة سلبية PCR السيطرة ( استخدام المياه كقالب ) ، واحدة إيجابية PCR السيطرة ( استخدام أنبوب 4 إيجابية مخفف كقالب ) . التحليل الكمي هو وصف الخطوات التالية فقط ،
10 . إضافة المكونات في علامة أنبوب على النحو المبين في الجدول أدناه ( هذا الجدول يسرد التكرار مرة واحدة فقط - بعد الانتهاء من وضع أنبوب عينة سلبية السيطرة ، السيطرة الإيجابية يجب أن تكون العينة في نهاية المطاف إضافة بعد كل أنبوب يتم تخزينها مع غطاء ) .
|
تكوينلكل أنبوب
|
عينة أنبوب ن |
الـ PCR السيطرة السلبية |
بكر إيجابية زوج الرعاية(أنابيب |
طريقة التحقيقqrt-pcr العازلة |
10 ميكرولتر |
10 ميكرولتر |
10 ميكرولتر |
طريقة التحقيقqrt-pcr انزيم مختلطة |
2ميكرولتر |
2ميكرولتر |
2ميكرولتر |
الماوس فيروس التهاب الكبد يدقق في طريقةqrt-pcr التمهيدي يدقق في الحل المختلط |
3 ميكرولتر |
3 ميكرولتر |
3 ميكرولتر |
عينة لفحصهاقالب الحمض النووي الريبي |
5μL |
- |
- |
المياه النقية جدا |
- |
5μL |
- |
第منحنى القياسية عينة مخفف من 7 خطوات ( رقم 2-6 ) |
- |
- |
كلل ( 2 إلى 2 ، 3 إلى 3 . . . ) |
11.بعد إغلاق الغطاء ، اضغط على المعلمات التاليةqRT-PCR:
عملية |
درجة الحرارة |
الوقت |
عكس النسخ |
50℃ |
30 دقيقة |
قبل التشويه والتحريف |
94℃ |
10 دقايق |
qrt-pcr فعل ( 40 دورة ) |
94℃ |
15 ثانية |
60℃ |
الحصول على إشارة مضان من فام قناة |
رابعا : معالجة البيانات
12 - إذا كان هذا كاشف عدة تستخدم في الكشف الكمي ، سجل قيمة إيجابية السيطرة على تركيز المحور الأفقي ، CT قيمة المحور الطولي ، رسم المنحنى القياسي . ثم سجل قيمة تركيز الحمض النووي الريبي في عينة تم حسابها من منحنى القياسية مع CT قيمة العينة التي سيتم الكشف عنها .
13 . إذا كانت هذه المجموعة تستخدم في الكشف النوعي ، الحكم فقط إيجابية أو سلبية ، ثم السيطرة السلبية CT يجب أن يكون أكبر من أو يساوي 40 . يجب أن يكون هناك زيادة اللوغاريتم مضان ، نموذجية منحنى التضخيم ، CT قيمة أقل من أو يساوي 30 . عينة اختبار سلبي إذا كان التصوير المقطعي هو أكبر من أو يساوي 40 و إيجابية إذا كان أقل من أو يساوي 35 . إذا كان بين 35 و 40 ، كرر ذلك مرة أخرى . CT قيمة تكرار التجارب السلبية إذا كان أكبر من أو يساوي 40 ، أو إيجابية إذا كان أقل من 35 .