الرئة البشرية خلايا بطانة الاوعية الدموية الدقيقة

جميع منتجات الشركة هي التجارب العلمية فقط ، لا تفعل التجارب العلمية الأخرى خارج استخدام !

الإنسان بطانة الاوعية الدموية الدقيقة المعزولة من أنسجة الرئة . الرئة هي الجهاز التنفسي في الجسم ، وتقع في الصدر ، اليسار واليمين ، على التوالي ، فوق القلب . الرئة مفصص ، اليسار واليمين ثلاثة ، ما مجموعه خمسة فصوص . الرئة من خلال نظام الرئة ( يشير إلى القصبة الهوائية ، القصبات الهوائية ، الخ ) مع الحنجرة والأنف ، الحنجرة يسمى بوابة الرئة والأنف خارج الرئة . خلايا بطانة الاوعية الدموية الدقيقة تشارك عن كثب في سلسلة من ردود الفعل الفسيولوجية والالتهابية ، بما في ذلك تجديد وتطوير التئام الجروح . الخلايا في شكل مغزلي أو مضلع ، وتشكيل طبقة واحدة بعد حصاة أو رصف مثل الترتيب . إن خلايا بطانة الاوعية الدموية الدقيقة في الرئة تشكل حاجز شبه انتقائي ، الذي يلعب دورا هاما في تبادل الغازات في الرئة وتنظيم تدفق السوائل والمواد القابلة للذوبان بين الدم والرئة الخلالي .

طريقة العرض :

خلايا بطانة الاوعية الدموية الدقيقة المعزولة من الرئة البشرية في المختبر تم إعدادها من قبل كتلة الأنسجة طريقة جنبا إلى جنب مع الثقافة المتوسطة الخاصة من الخلايا البطانية .

اختبار الجودة :

الرئة البشرية الاوعية الدموية الدقيقة البطانة المعزولة من المختبر تم تحديدها من قبل cd31 المناعي ، نقاء يمكن أن تصل إلى أكثر من 90 ٪ ، لا تحتوي على فيروس نقص المناعة البشرية - 1 ، الالتهاب الكبدي الوبائي ، سي ، الميكوبلازما ، البكتيريا والخميرة والفطريات .

حالة التغليفبل ( 0.1 مغ / مل ) أو الجيلاتين ( 0.1 في المائة )

الثقافة المتوسطةيحتوي على سلاح ، إضافات النمو ، penicillin ، streptomycin ، الخ .

تغيير الترددتغيير السوائل كل 2-3 أيام

خصائص النموعصا الجدار

شكل الخليةمثل الخلايا البطانية

خصائص مروريمكن أن تنتقل إلى الجيل 2-3

السائل الهضمي1 ف - 4

الأعمال التحضيرية

1 - إعداد المعدات التجريبية : إعداد أطباق بتري معقمة ، وزجاجات ، ماصات ، أنابيب الطرد المركزي ، والأدوات الجراحية ، وما إلى ذلك ، وإجراء التعقيم أو التعقيم المناسبة الأخرى .

2 - إعداد الكواشف : إعداد أو شراء مناسبة متوسطة الثقافة ، انزيم الهضم ( على سبيل المثال ، كولاجيناز ، وما إلى ذلك ) ، مصل بقري جنيني ، ومضادات الأكسدة وغيرها من الكواشف لضمان أن تكون عقيمة وفعالة .

3 - إعداد الحيوانات المختبرية أو الأنسجة المصدر : اختيار الحيوانات المناسبة وفقا لمتطلبات التجربة ، وإجراء المقابلة التخدير أو الإعدام ، والحصول على الأنسجة المطلوبة . أو الحصول على المنظمة من عينة الأنسجة الموجودة في المكتبة .

أخذ العينات والعلاج

1 . استخراج المواد : تحت ظروف معقمة ، وإزالة الأنسجة المستهدفة بسرعة ، والحد من الضرر على الأنسجة ، وإزالة الدهون الزائدة ، والأنسجة الضامة وغيرها من الأنسجة غير المستهدفة .

2 . تنظيف : إزالة الأنسجة مع ما قبل التبريد العقيم برنامج تلفزيوني شطف عدة مرات لإزالة الدم والشوائب .

3 - القص : قطع الأنسجة إلى قطع صغيرة من حوالي 1-2 ملم مكعب ، من أجل الهضم اللاحقة .

عزل الخلايا

1 - الهضم : قطع قطعة من الأنسجة في أنبوب الطرد المركزي يحتوي على كمية مناسبة من انزيم الهضم الهضم في 37 ℃ يهزّ طاولة أو حاضنة لبعض الوقت . أثناء عملية الهضم ، أنبوب الطرد المركزي يمكن أن يهز بلطف ، مما يجعل الجهاز الهضمي أكثر موحدة .

2 - إنهاء عملية الهضم : عندما يتم هضم معظم الأنسجة في تعليق خلية واحدة أو مجموعة صغيرة من الخلايا ، إضافة المصل تحتوي على وسائل الإعلام لإنهاء عملية الهضم .

3 - الترشيح و الطرد المركزي : استخدام خلية غربال لتصفية تعليق خلية ، وإزالة الأنسجة غير المهضوم شظايا ، ثم تصفية الطرد المركزي في سرعة مناسبة ، وجمع الخلايا هطول .

خلية المراقبة والكشف

1 . المراقبة اليومية : استخدام المجهر المقلوب لمراقبة مورفولوجيا الخلايا ، والنمو ، الكثافة ، وما إلى ذلك ، تسجيل التغيرات في الخلايا ، مثل العثور على الخلايا الملوثة أو غير طبيعي ، في الوقت المناسب لاتخاذ التدابير المناسبة .
2 - عدد الخلايا و الكشف عن النشاط : عند الضرورة ، التريبان الأزرق تلطيخ يمكن استخدامها للكشف عن عدد الخلايا و النشاط من أجل فهم نمو الخلايا و الحالة الصحية .

استخراج وفصل

1 . عملية سريعة

- يجب معالجة الأنسجة مباشرة بعد أخذ العينات ، وتجنب التعرض لفترات طويلة إلى درجة حرارة الغرفة أو البيئة غير الغذائية .

- شطف الأنسجة باستخدام برنامج تلفزيوني معقم أو محلول فسيولوجي لإزالة الدم والشوائب .

2 - اختيار الإنزيمات الهاضمة

- اختيار الإنزيمات الهاضمة وفقا لنوع الأنسجة ، وتجنب الإفراط في الهضم مما يؤدي إلى تلف الخلايا .

- وقت الهضم يجب أن تسيطر عليها بدقة ( عادة 10-30 دقيقة ) ، ويمكن ملاحظة حالة تفكك الخلية بواسطة المجهر .

تحسين ظروف الزراعة

1 - اختيار وسائل الإعلام

- استخدام وسائل الإعلام التي تحتوي على المصل أو بعض عوامل النمو ( على سبيل المثال dmem rpmi 1640 , الخ ) ، بعض الخلايا تحتاج إلى إضافة الأنسولين ، لو ، الخ .

- تجنب تغيير العلامات التجارية أو دفعات من وسائل الإعلام في كثير من الأحيان ، والحد من الإجهاد التكيف الخلوي .

2 . عصا الجدار و مرور

- ضعف قدرة الخلايا الأولية على الالتصاق بالجدران ، وقد تتطلب طلاء أطباق بتري ( مثل الكولاجين ، polylysine ) .

- كثافة مرور الوقت اقترح أن تسيطر على 70 ٪ - 80 ٪ ، والإفراط في التقارب يمكن أن يؤدي إلى تثبيط الاتصال والتمايز .

ثالثاً - مكافحة التلوث

1 . عملية معقمة

- العملية برمتها في مكتب سوبر نظيفة ، واستخدام المواد الاستهلاكية القابل للتصرف ، وتجنب التلوث الصليب .

- يمكن إضافة مقاومة مزدوجة في المتوسط ، ولكن استخدام على المدى الطويل قد تؤثر على نشاط الخلايا .

الكشف عن الميكوبلازما

- الكشف المنتظم عن تلوث الميكوبلازما ( على سبيل المثال ، بكر ) بعد التلوث ، يجب التخلص من الخلايا في الوقت المناسب .

رصد حالة

1 - المراقبة اليومية

- فحص شكل الخلية وكثافتها ولون المتوسط يوميا ، واستبدال المتوسط في الوقت المناسب ( عادة كل 2-3 أيام ) .

- قد تشير الأشكال الشاذة ( مثل الخلايا المستديرة أو الشظايا المتزايدة ) إلى التلوث أو نقص التغذية .

2 - مرور وتجميد

- عدد محدود من انقسام الخلايا الأولية ( عادة 5-10 أجيال ) التي تحتاج إلى وقت مبكر بالتبريد .

- يقترح استخدام DMSO + مصل ( أو متوسطة خاصة للتخزين بالتبريد ) للتخزين بالتبريد مع النيتروجين السائل بعد التدرج في درجة الحرارة .