البروستاتا البشرية الخلايا الليفية

البروستاتا البشرية الليفية المعزولة من أنسجة البروستاتا . البروستات )prostate هو جهاز الغدد التناسلية في الذكور . غدة البروستاتا هو زوج من الرحم متني يتكون من الأنسجة الغدية والعضلات . البروستات مثل الكستناء ، أسفل إلى أعلى ، مع المثانة ، وأشار إلى أسفل ، ضد المسالك البولية والتناسلية الحجاب الحاجز ، أمام الالتصاق العانة ، خلف المستقيم . غدة البروستاتا في منتصف مجرى البول من خلال عقد مجرى البول العلوي الفم ، لذلك ، عندما يكون هناك مشكلة في البروستاتا ، التبول يتأثر أولا . البروستات هي نادرة جدا في الجسم ، مع وظيفة مزدوجة من إفراز الغدد الجنسية الداخلية والخارجية . كما إفرازي غدة البروستاتا يفرز سائل البروستاتا كل يوم ، هو العنصر الرئيسي الذي يشكل السائل المنوي . كما الغدد الصماء والبروستاتا تفرز هرمون يسمى " البروستاجلاندين " . الخلايا الليفية هي العنصر الرئيسي في النسيج الضام فضفاض ، المستمدة من الخلايا اللحمية الجنينية . الخلايا الليفية هي أكبر ، واضحة المعالم ، ومعظمهم من بروز المغزل أو نجمة مثل هيكل مسطح ، نواة بيضاوية منتظمة ، نويات كبيرة وواضحة . الخلايا الليفية لديها وظائف قوية ، وضعف القلوية السيتوبلازم ، ومن الواضح أن تخليق البروتين وإفراز الأنشطة . الخلايا الليفية تلعب دورا هاما في انحطاط ، نخر ، وإصلاح الأنسجة عيب . البروستاتا الخلايا الليفية التي تم فصلها حديثا كانت دائرية و الانكسار جيدة و علقت في الثقافة المتوسطة . في غضون 30 دقيقة ، جزء من الخلايا الملتصقة الجدار بدأت تمتد pseudopods ، مما يدل على عملية صغيرة . بعد 6 ساعات ، كانت الخلايا ملتصقة تماما ، وتمتد إلى مغزلي الشكل ، نواة الخلية كانت واضحة ، وزعت بشكل موحد . الخلايا تنمو بسرعة ، 5-7 أيام تظهر حالة الانصهار ، ترتيب الخلايا المدمجة ، بعض التداخل عبر النمو ، على نحو سلس ، أكبر من السيتوبلازم ، السيتوبلازم شفافة ، نواة أكبر ، بيضاوي الشكل ، لون الضوء . الخلايا تنصهر مع بعضها البعض لتشكيل شبكة . الخلايا تظهر نتوء المغزل أو شقة على شكل نجمة .
طريقة العرض :

مختبر عزل البروستاتا البشرية باستخدام الأليافيي البروتيني كولاجيناز مختلطة الهضم جنبا إلى جنب مع الفرق في الالتصاق تم إعدادها . خلايا / زجاجات .
اختبار الجودة :

شركة مختبر عزل ألياف البروستاتا البشريةvimentin immunofluorescence تحديد نقاء يمكن أن تصل إلى أكثر من 90 ٪ ، لا تحتوي على فيروس نقص المناعة البشرية - 1 ، الالتهاب الكبدي الوبائي ، سي ، الميكوبلازما ، البكتيريا والخميرة والفطريات .

جميع منتجات الشركة هي التجارب العلمية فقط ، لا تفعل التجارب العلمية الأخرى خارج استخدام !

الثقافة المتوسطة احتواءFBS、 إضافات النمو ، penicillin streptomycin , الخ .

تغيير التردد كلتغيير السوائل مرة واحدة في 2-3 أيام

خصائص النمو عصا الجدار

شكل الخلية مثل الخلايا الليفية

خصائص مرور يمكن تمريرحوالي 5 أجيال ; في حالة الجيل الثالث

السائل الهضمي 0.25 ٪ يي البروتيني

حالة ثقافة مرحلة الغاز : الهواء ،95%； ثاني أكسيد الكربون، 5 في المائة

الأعمال التحضيرية

1 - إعداد المعدات التجريبية : إعداد أطباق بتري معقمة ، وزجاجات ، ماصات ، أنابيب الطرد المركزي ، والأدوات الجراحية ، وما إلى ذلك ، وإجراء التعقيم أو التعقيم المناسبة الأخرى .

2 - إعداد الكواشف : إعداد أو شراء مناسبة متوسطة الثقافة ، انزيم الهضم ( على سبيل المثال ، كولاجيناز ، وما إلى ذلك ) ، مصل بقري جنيني ، ومضادات الأكسدة وغيرها من الكواشف لضمان أن تكون عقيمة وفعالة .

3 - إعداد الحيوانات المختبرية أو الأنسجة المصدر : اختيار الحيوانات المناسبة وفقا لمتطلبات التجربة ، وإجراء المقابلة التخدير أو الإعدام ، والحصول على الأنسجة المطلوبة . أو الحصول على المنظمة من عينة الأنسجة الموجودة في المكتبة .

أخذ العينات والعلاج

1 . استخراج المواد : تحت ظروف معقمة ، وإزالة الأنسجة المستهدفة بسرعة ، والحد من الضرر على الأنسجة ، وإزالة الدهون الزائدة ، والأنسجة الضامة وغيرها من الأنسجة غير المستهدفة .

2 . تنظيف : إزالة الأنسجة مع ما قبل التبريد العقيم برنامج تلفزيوني شطف عدة مرات لإزالة الدم والشوائب .

3 - القص : قطع الأنسجة إلى قطع صغيرة من حوالي 1-2 ملم مكعب ، من أجل الهضم اللاحقة .

عزل الخلايا

1 - الهضم : قطع قطعة من الأنسجة في أنبوب الطرد المركزي يحتوي على كمية مناسبة من انزيم الهضم الهضم في 37 ℃ يهزّ طاولة أو حاضنة لبعض الوقت . أثناء عملية الهضم ، أنبوب الطرد المركزي يمكن أن يهز بلطف ، مما يجعل الجهاز الهضمي أكثر موحدة .

2 - إنهاء عملية الهضم : عندما يتم هضم معظم الأنسجة في تعليق خلية واحدة أو مجموعة صغيرة من الخلايا ، إضافة المصل تحتوي على وسائل الإعلام لإنهاء عملية الهضم .

3 - الترشيح و الطرد المركزي : استخدام خلية غربال لتصفية تعليق خلية ، وإزالة الأنسجة غير المهضوم شظايا ، ثم تصفية الطرد المركزي في سرعة مناسبة ، وجمع الخلايا هطول .

خلية المراقبة والكشف

1 . المراقبة اليومية : استخدام المجهر المقلوب لمراقبة مورفولوجيا الخلايا ، والنمو ، الكثافة ، وما إلى ذلك ، تسجيل التغيرات في الخلايا ، مثل العثور على الخلايا الملوثة أو غير طبيعي ، في الوقت المناسب لاتخاذ التدابير المناسبة .
2 - عدد الخلايا و الكشف عن النشاط : عند الضرورة ، التريبان الأزرق تلطيخ يمكن استخدامها للكشف عن عدد الخلايا و النشاط من أجل فهم نمو الخلايا و الحالة الصحية .

استخراج وفصل

1 . عملية سريعة

- يجب معالجة الأنسجة مباشرة بعد أخذ العينات ، وتجنب التعرض لفترات طويلة إلى درجة حرارة الغرفة أو البيئة غير الغذائية .

- شطف الأنسجة باستخدام برنامج تلفزيوني معقم أو محلول فسيولوجي لإزالة الدم والشوائب .

2 - اختيار الإنزيمات الهاضمة

- اختيار الإنزيمات الهاضمة وفقا لنوع الأنسجة ، وتجنب الإفراط في الهضم مما يؤدي إلى تلف الخلايا .

- وقت الهضم يجب أن تسيطر عليها بدقة ( عادة 10-30 دقيقة ) ، ويمكن ملاحظة حالة تفكك الخلية بواسطة المجهر .

تحسين ظروف الزراعة

1 - اختيار وسائل الإعلام

- استخدام وسائل الإعلام التي تحتوي على المصل أو بعض عوامل النمو ( على سبيل المثال dmem rpmi 1640 , الخ ) ، بعض الخلايا تحتاج إلى إضافة الأنسولين ، لو ، الخ .

- تجنب تغيير العلامات التجارية أو دفعات من وسائل الإعلام في كثير من الأحيان ، والحد من الإجهاد التكيف الخلوي .

2 . عصا الجدار و مرور

- ضعف قدرة الخلايا الأولية على الالتصاق بالجدران ، وقد تتطلب طلاء أطباق بتري ( مثل الكولاجين ، polylysine ) .

- كثافة مرور الوقت اقترح أن تسيطر على 70 ٪ - 80 ٪ ، والإفراط في التقارب يمكن أن يؤدي إلى تثبيط الاتصال والتمايز .

ثالثاً - مكافحة التلوث

1 . عملية معقمة

- العملية برمتها في مكتب سوبر نظيفة ، واستخدام المواد الاستهلاكية القابل للتصرف ، وتجنب التلوث الصليب .

- يمكن إضافة مقاومة مزدوجة في المتوسط ، ولكن استخدام على المدى الطويل قد تؤثر على نشاط الخلايا .

الكشف عن الميكوبلازما

- الكشف المنتظم عن تلوث الميكوبلازما ( على سبيل المثال ، بكر ) بعد التلوث ، يجب التخلص من الخلايا في الوقت المناسب .

رصد حالة

1 - المراقبة اليومية

- فحص شكل الخلية وكثافتها ولون المتوسط يوميا ، واستبدال المتوسط في الوقت المناسب ( عادة كل 2-3 أيام ) .

- قد تشير الأشكال الشاذة ( مثل الخلايا المستديرة أو الشظايا المتزايدة ) إلى التلوث أو نقص التغذية .

2 - مرور وتجميد

- عدد محدود من انقسام الخلايا الأولية ( عادة 5-10 أجيال ) التي تحتاج إلى وقت مبكر بالتبريد .

- يقترح استخدام DMSO + مصل ( أو متوسطة خاصة للتخزين بالتبريد ) للتخزين بالتبريد مع النيتروجين السائل بعد التدرج في درجة الحرارة .