rk-13 ( أرنب خط الخلية الكلوية )

معالجة الخلايا

1 ) إنعاش الخلايا المجمدة :

تجميد أنبوب يحتوي على 1 مل من تعليق خلية كان مهزوز بسرعة وذاب في 37 ℃ حمام مائي ، ثم أضيفت إلى أنبوب الطرد المركزي تحتوي على 4-6 مل من الثقافة المتوسطة . في 1000 دورة في الدقيقة ، الطرد المركزي لمدة 3-5 دقائق ، supernatants كانت مهجورة و الخلايا المتوسطة كانت معلقة مرة أخرى . تعليق خلية ثم أضيفت إلى قارورة تحتوي على 6-8ml متوسطة الثقافة ( أو طبق ) لمدة ليلة في 37 ℃ . . . . . . . نمو الخلايا و كثافة الخلية لوحظ تحت المجهر في اليوم التالي .

2 ) مرور الخلية : إذا كانت كثافة الخلية تصل إلى 80 ٪ - 90 ٪ ، يمكن أن تحمل على مرور الثقافة .

يمكن الإشارة إلى الطرق التالية من أجل مرور الخلايا الملتصقة :

1 - إزالة طاف ، وغسل الخلايا مع برنامج تلفزيوني بدون أيونات الكالسيوم والمغنيسيوم 1-2 مرات .

2 - إضافة 0.25 في المائة ( ث / ت ) - 0.53 ملم EDTA في قارورة ( T25 1-2ml ، T75 2-3ml ) و يهضم في 37 ℃ لمدة 1-2 دقيقة ( عسر الهضم الخلايا يمكن أن تطيل فترة الهضم بشكل صحيح ) ، ثم لاحظ تحت المجهر ، إذا كان معظم الخلايا تصبح مستديرة و تقشر ، تأخذ مرة أخرى إلى طاولة العمليات بسرعة .

3 - ضخ بلطف ، الطرد المركزي في 1000 دورة في الدقيقة لمدة 3-5 دقائق ، تجاهل طاف ، إضافة 1-2 مل متوسطة الثقافة ثم تهب بالتساوي . تعليق خلية تم تقسيمها إلى 2 : 1 زجاجة T25 ، 6-8 مل من وسائل الإعلام الجديدة أضيفت إلى الحفاظ على نمو الخلايا .

cryopreserved الخلايا : بعد تلقي الخلايا ، فمن المستحسن أن cryopreserved دفعة من بذور الخلايا في أول 3 أجيال من الثقافة لاستخدامها في التجارب اللاحقة .

rk-13 ( أرنب خط الخلية الكلوية )

خصائص السلع

عرض السلع

العمر ( الجنس ) خمسة أسابيع من العمر

المصدر التنظيمي الكليتين

خصائص النمو خلية ملتصقة

شكل الخلية الخلايا الظهارية مثل

مستوى السلامة البيولوجية 2

متوسطة النمو MEM + 10٪ FBS + 1٪ P / S

النسبة الموصى بها 1 : 2-1 : 4

أوصى السائل تغيير التردد 2-3 مرات في الأسبوع

حالة التجميد

سائل التجميد55 ٪ الركيزة + 40 ٪ سلاح + 5 ٪ دمسو

درجة الحرارة : النيتروجين السائل

حالة ثقافة

مرحلة الغاز : الهواء ،95%； ثاني أكسيد الكربون، 5 في المائة

درجة الحرارة37℃

خطوات عملية زراعة الخلايا :

( 1 ) عندما شكل الخلية و كثافة النمو تصل إلى 90 ٪ تحت المجهر .

( 2 ) امتصاص والتخلص من الثقافة المتوسطة . إضافة برنامج تلفزيوني لتنظيف 1 ~ 2 مرات ، يهز جيدا ثم التخلص منها .

( 3 ) إضافة كمية من غطاء زجاجة أسفل ويحتوي على يدتا .

( 4 ) الثقافة قارورة وضعت في 37 ℃ حاضنة الهضم ، حوالي 3 دقائق تأخذ بها ، باستخدام المجهر لمراقبة ما إذا كان هناك أكثر من 80 ٪ من الخلايا ، يتقلص إلى دائرة ، خلية الفضاء يصبح أكبر . بات بلطف زجاجة الثقافة لجعل الخلايا المتبقية من السقوط ، إضافة 2 مرات كمية لوقف الهضم ، وضرب بالتساوي لتجنب الإفراط في الهضم .

تعليق خلية تم امتصاصه في أنبوب الطرد المركزي الطرد المركزي 1000rpm / دقيقة لمدة 3 ~ 5 دقائق .

supernatants تم امتصاصه ، ثم الخلايا كانت معلقة مرة أخرى في الثقافة المتوسطة .

( 7 ) امتصاص تعليق الخلية ، واختيار الكثافة المناسبة للتطعيم في ثقافة جديدة زجاجة ، تجديد الثقافة المتوسطة و يهز جيدا ، وضعت في 37 ℃ ثاني أكسيد الكربون حاضنة الثقافة .

( 8 ) تغيير أو مرور الوقت يتحدد حسب حالة نمو الخلايا .

تجميد الخلية

بعد تلقي العلاج بالخلايا :

1 ) بعد تلقي الخلايا ، 75 ٪ من الكحول زجاجة تعقيم الجدار سوف توضع في زجاجة T25 37 ℃ حاضنة حوالي 2-3 ساعات ، إذا وجدت أن الثقافة زجاجة مكسورة ، تسرب السائل ، وتلوث الخلايا ، يرجى الاتصال بنا في الوقت المناسب بعد التقاط الصور .

2 ) يرجى التأكد من حالة الخلية تحت المجهر 4 أو 5 س ، وفي الوقت نفسه التقاط الصور من الخلايا التي تم تلقيها حديثا ( 10 × 20 × 2-3 ) على التوالي ، والحفاظ على صورة من ظهور ثقافة زجاجة ، كأساس للحصول على حالة الخلية بعد البيع .

3 ) خلية ملتصقة : الخلايا توضع في حاضنة الثقافة 37 ℃ لمدة 2-3 ساعات ، نمو الخلايا الملتصقة لوحظ تحت المجهر . إذا كانت كثافة نمو الخلايا أقل من 60 ٪ ، متوسطة الثقافة يمكن إزالتها ( إذا كانت الخلايا غير ملتصقة تحتاج إلى إعادة تدويرها بواسطة الطرد المركزي ، ثم علقت في الثقافة الأصلية زجاجة ) و 6-8 مل من الثقافة المتوسطة الجديدة تضاف إلى الثقافة خلية مربع . إذا كان نمو الخلايا كثافة تصل إلى 70 ٪ - 80 ٪ ، يمكن أن تحمل على مرور العلاج . إذا كانت الخلايا التي فقدت بسبب الاهتزاز النقل تحتاج إلى إعادة تدويرها بواسطة الطرد المركزي .

منتجات الشركة للبيع :

رات البرسيم عاملtff2 طقم إليسا 96t

الماوس إشارة تنبيغ جزيء 7 smad7 , إليسا كيت

رات caelisakit انزيم ( كاليفورنيا ) طقم إليسا 96t / 48t

cliakitforhaase ( الإنسان هيالورونيداز elisakit ) .

cysteins الخلوية( caspase-8 اللونية النشطة كيت 20 مرة )

ratvascuolarscelladhesionmolecule1 vcam-1elisakit , الفئران خلايا بطانة الأوعية الدموية جزيء التصاق 1 ( vcam-1 / cd106 ) طقم إليسا 96t / 48t

fzd10 الماوس المؤتلف / fzd10 البروتين ( نادي التسمية )

أنجيوتنسين الثاني مستقبلات أنجيوتنسين الثاني مستقبلات أنجيوتنسين الثاني

المؤتلف الإنسان tie2 / cd202b / تك البروتين ( له و ضريبة السلع والخدمات التسمية )

csnk1g2 البروتين المؤتلف الإنسان csnk1g2

المؤتلف الفئران il20rb البروتين ( نادي التسمية )

سيستاتين3 ( cst3 المؤتلف البروتين )

csnk1g2 البروتين المؤتلف الإنسان csnk1g2

المؤتلف الماوس سيستاتين ه / CST6 البروتين

المؤتلف البروتين / nkg2a nkg2 cd159a / klrc1 ( نادي التسمية ) من klrc1 proteincynomolgus

المؤتلف الإنسان csnk2a2 / ck2a2 البروتين

RK-13 )أرنب خط الخلية الكلويةوالماوس المضادة المعقدةطقم إليسا 96t / 48t تات

رات هرمون الغدة الدرقية ، PTH إليسا كيت

حقوق glucoseanspoer1 gl1elisakit , نقل الجلوكوز 1 ( GL1 ) طقم إليسا 96t / 48t

حقوق 2 , 3-diphosphoglycerate ( 2 , 3-dpg ) طقم إليسا 96t / 48t

فطريات/ طقم عزل الحمض النووي الريبي مجموع خلايا الخميرة 20 مرات

الماوس ئي B100 ( apo-b100 ) طقم إليسا 96t / 48t

الماوس للذوبانp-selectin ( الماوس sp-selectin / scd62p ) إليسا كيت

ماوس .تأثير مادة ف ( الماوس substance ع ) إليسا كيت

الماوس البرولاكتين( موس PRL ) الدور : إليسا كيت

الفئران الحوامل( mouse prog ) الدور : إليسا كيت